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        蛋白质激酶C

        相关实验:用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物:

        5X PKC 分析缓冲液                                        4 μl

        10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液                             1 μl    

        [γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP)      1 μl

        水(取决于下一步所加的激酶样品的量)          0~14 μl 

        5X PKC 分析缓冲液:

        100 mmol/L Tris-HCl,30℃ 时(pH 7.5)

        25 mmol/L MgCl2

        1 mmol/L CaCl2

        100 μg/ml 磷脂酰丝氨酸(PS)

        10 μg/ml 甘油二油酸脂(Sigma)

        2. 往预热的反应混合物中加入 1~14 μl 激酶样品,开始反应。

        3. 于 30℃ 反应一定时间。

        4. 分析反应产物。

        来源:丁香实验

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