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科研学霸天团，48小时有问必答

问贴壁细胞染色是否可以在非超净台的地方完成，后续还需要担心污染？可否用37℃烘箱孵育？

huarenqiang5

为了避免被污染建议在超净台进行操作比较好。可以用烘箱孵育。

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问贴壁细胞总是成团贴壁？

huarenqiang5

常见几点原因及建议:1.消化的过程过于粗暴，吹打太用力，消化过久，消化液太强或有毒性等会导致细胞死亡。细胞死亡后会释放出DNA，缠绕其他细胞，形成黏性的细胞团。2、细胞离心速度过大或时间太长，也容易造成细胞抱团。3、消化不完全的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；消化过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难。4、状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长得太满才传代、

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问普通免疫荧光可以验证自噬吗？

loveliufudan

对,如果没有GFP-LC3转染,也可以直接用LC3抗体做免疫荧光来检测自噬。主要步骤是:1. 固定细胞,一般用4%多聚甲醛固定10-20分钟。2. perfor化,用0.1-0.5% Triton X-100处理,打开细胞膜的孔隙。3. 封闭,用5-10%的羊血清或BSA封闭1小时,减少非特异性染色。 4. 一抗,加LC3抗体(1:200-1:500稀释),4°C过夜。5. 二抗,加入标有荧光素

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问sci英文书写规范有哪些？需要注意什么

默然前进前行

sci英文论文包含如下几部分，每部分的格式如下：　　(1)sci论文题名(Title)。论文题名应简明、确切,不要太长、太笼统。英文标题开头第一词禁用The、and、an、a，尽量少用缩略语，要省去定冠词和不定冠词;题名内不应列入非公知公用的符号、代号，以及数学公式、化学结构式等。标题要主旨明确，要用实词，标题主旨和论文的主旨要一致。　　(2)作者姓名(Authors)。作者姓名应按国标GB/T

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问写作过程中数据不懂处理怎么快速掌握？另外，投稿的时候不知道怎么选择杂志

huarenqiang5

主要从以下几点来进行数据处理:1.数据收集。数据的收集可以通过多种方式进行，如手动输入、自动采集、调查问卷等。2.数据清洗数据清洗是指对数据进行整理和过滤,以确保数据的一致性和准确性。

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问中西医结合专业难题缺乏中、西医相对应性语言及行业标准，怎样提高审稿通过率？

huarenqiang5

可以参考以下几点建议:1. 选择合适的期刊：在投稿之前，仔细选择合适的期刊。选择那些以快速审稿和出版为特点的期刊，可以减少审稿时间。2. 阅读期刊的指南和要求：在撰写和提交论文之前，仔细阅读期刊的指南和要求。确保你的论文符合期刊的格式、范围和要求，这样可以减少不必要的修改和延误。3. 提交完整和高质量的论文：在提交论文之前，确保论文完整、无拼写和语法错误，并经过仔细的校对和修改。提供高质量的论文可

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问统计等专业难题，图表如何美观简洁

huarenqiang5

几点建议:1、借助做图工具。科学论文图表的制作原则主要是规矩、简单、美观和专业。常用的做图软件有：Excel、Microsoft Visio、PowerPoint、Origin、Mathematica/Matlab、Latex。2、清楚所投期刊的图表要求。很多出版社会更倾向于作者已经按期刊的格式将格式调整好了，不仅美观还会给审稿人留下一个好印象。像汉斯出版社期刊的格式是：文中的图片应确保内容清晰。

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问课题立题，统计分析及论文书写

sswei

常用的统计方法选择01看研究目的不同的研究目的影响统计方法的选择，研究目的非常繁杂，也不太容易分类，但从对统计方法选择有无影响的角度，把研究目的分成3大类：1.描述类此类研究一般是观察某些指标的分布情况，如某种疾病的患病率或者某个指标的水平，管理类研究中经常描述各类人群的构成比等，此类都只做描述，不做统计检验。2.对比类也即统计推断类，主要目的是对比几组间的指标差异是否有统计学意义，或者是否高

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问论文写作结构与语言

dxy_gmhgag58

1、并列式结构 2、串式结构3、伞式结构4、复式结构

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问路呢协助求助

huarenqiang5

这个情况建议你找导师帮忙指导才有机会。

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问不知道选择的统计方法是否正确，应该投哪个期刊更为合适

sswei

期刊是否合适，主要看期刊征收范围与论文研究方向是否一致，期刊的选择还决定着投稿的论文能否被期刊收录和发表。

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问论文如何润色，如何提高投稿命中率

huarenqiang5

找专门的润色机构可以提高命中率。

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问缺乏自我管理，写论文需要计划时间、分配任务、自我管理等，但临床上没有足够的时间

huarenqiang5

首先做一个计划表，然后你自己从业余时间里面挤时间出来进行相关工作。

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问经常想不出好的点子，好不容易想到一个，查文献时发现已经有相关文章了。又缺乏老师指导，怎么办？

此用户已注销

读文献之所以重要就在于可以找创新点。大白话就是缝合，这里抄一点，那里摘一点。没有那么多原创，都是要“站在巨人的肩膀上”的。你想清楚这一点，压力会少很多。老师来一句，你这实验方案没有创新性啊。起码不会担心自己智力问题，不会怀疑自己脑子不好。只是自己读文献不够多，经验不够，能补上来。去再读个十来篇，再缝一次，或许就会满意了。再把文章附在方案下面，要记得是最新的文章，大概率能说服老师。材料的一些创新就很

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问医学写作选题

huarenqiang5

选题的几点建议:1.选取当前热点问题作为出发点；2. 根据所处发展阶段，选择成熟度适宜的课题；3. 多范围内进行选题，关注不同学科领域的发展方向。

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问请问中药颗粒细胞给药，颗粒要怎么溶解啊？是溶于水还是溶于无血清培养基还是dmso呢？

loveliufudan

关于中药颗粒给细胞实验的溶解方法和用量,建议如下:1. 中药颗粒最好先溶解在无血清培养基或浓度适中的DMSO中,然后再稀释至工作浓度。直接溶于水效果不佳。2. 溶解用的无血清培养基要去掉菌,防止污染。DMSO要制成无水的稀释物。3. 溶解浓度根据颗粒性质而定,一般选择0.1-1 mg/ml的范围,完全溶解。超声波功率可提高溶解度。4. 工作浓度根据实验目的在10-500 μg/ml范围确定,需要先

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问购买的原代细胞是不是不建议冻存呀？卖细胞的公司说不建议冻存，有的说可以冻存～那不冻存，原代细胞就无法做完实验怎么办？

loveliufudan

关于原代细胞是否可以冻存,我的建议是:1. 理论上大多数原代细胞都可以冻存,但部分细胞表型可能会有变化。2. 不建议冻存的原因可能是冻存存活率不高,公司想确保细胞活性。3. 如果打算冻存,需要优化冻存保护剂配方和复苏条件,提高存活率。4. 冻存前应测试细胞活力良好,避免对试验影响。5. 如果无法冻存,可以分批次订购原代细胞,根据实验进度使用。6. 也可以采用扩增传代的方法,从少量原代细胞扩增储备使

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问小样本是否可以用均值表示药代动力学参数?

sswei

小样本情况下可以使用T分布来检验。但是思路是这样的——对样本均值进行假设检验时，在总体方差已知时使用Z检验，总体方差未知时需要使用样本方差来代替总体方差，所以才会使用T检验；而这些的前提都是样本均值服从于正态分布；而样本均值服从正态分布的前提是中心极限定理，而这个定理需要样本量足够大（也就是大样本）。所以大样本是满足T检验和Z检验的基础，而不是区分T和Z的条件（区分的条件是总体方差是否已知）。

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问coip非特异性结合

loveliufudan

建议可以从以下几个方面进行优化:1. 调整洗涤条件,增加洗涤次数,也可以试试高盐洗涤液减少非特异性结合。2. 检查所用抗体,高质量抗体特异性更好,可以减少背景。可以试试不同克隆或品牌的抗体。3. 增加封闭蛋白量,一般3-5% BSA或脱脂奶粉,封闭1-2小时。这可以有效降低背景。4. 如果仍存在问题,可以使用Preclearing步骤,先让样品与控制IgG或蛋白A/G球孵育,洗去非特异性结合后再免

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问PB缓冲液pH可以调到9.6吗？

汤姆卜丽波

可以调的，你们实验室平时用什么调就用什么调，我们一般用氢氧化钠和硫酸

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