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贴壁细胞长满了不换瓶会怎样?
沙砾FLY
在动物细胞培养时,用培养瓶培养细胞就有贴壁生长,接触抑制的特点,如果细胞贴壁生长长满整个瓶身,以后细胞将不会再增殖,也不会出现长两层细胞的现象,这个时候就需要更换培养瓶和培养液,否则细胞将停止增殖。癌变的细胞就不会受到这一性质的限制。癌变的细胞贴壁生长长满瓶壁出现接触以后并不会出现抑制现象,还可以无限增殖。意思说,细胞可以长出两层,三层甚至更多层,无限增殖下去,最后就会出现一个肿瘤类的细胞团,一团
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问
细胞复苏后的第二天需要换液吗?
dxy_non823e7
因为细胞冻存液中的DMSO对细胞有害,虽然复苏的时候去掉了上清液,但是多少还会有残留,所以比较建议细胞复苏起来的第二天换液。但是我也试过第二天不换液,细胞长得也可以。
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问
细胞培养瓶中的细胞不贴壁是什么原因?
bamboopiggy
你这是什么细胞?感觉细胞是死了的,都圆了。
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问
请问用一段时间的细胞,怎么检测细胞有没有感染其他组织?有什么试剂盒或者检测方法吗?
n0y0j7
感染其他组织?我觉得实验室同时有几种长的快的癌细胞,会不会某个瓶里两种细胞都有?会相互克制少的被灭了,还是形态各异很好区分能看出来,种属一样的话检测估计不好检测。
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问
细胞没有污染,血清浓度为20%,DMEM高糖培养基,但是细胞长的状态不好的原因?细胞没有过度消化
Eason老歌迷
更换不同的培养基或者血清看看,是不是细胞培养基的有些营养成分少了。
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问
原核蛋白纯化,上清跑胶有带,纯化后没带是什么原因
yangyang214
检测结合后的上清,以及beads,看是没结合上还是没洗脱下来。
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问
请问大家配好的培养基在4℃最多能放多久?如果在60℃水浴了一下午,培养基还能用吗?
未来9
密封灭菌后放置在2-8℃冰箱内可以保存三个月,普通的培养基平板可以保存一个月或更久。60℃水浴了一下午,培养基还可以用的。
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问
细胞培养基里出现小黑点,但是溶液没有变浑浊,怎么去除呢?
Eason老歌迷
可以做一下支原体检测,如果排除了支原体污染,可以看看是不是细胞老化,或者黑胶虫污染
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问
为什么要热灭活血清?
bamboopiggy
灭活其中的补体,一般养免疫细胞要热灭火血清
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问
L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?
Eason老歌迷
肯定重要,它不仅可以提供能量,而且蛋白质的合成和核酸代谢的也有它的参与。至于说它稳不稳定,其实它并不是一种稳定的氨基酸,在中性水溶液中会自发降解,4℃冰箱内放置2周,大部分谷氨酰胺就没了。
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问
细胞解冻的相关问题?
ZPODY
推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的首选方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养
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问
关于细胞培养消化时间问题?
dxy_elk098he
消化中途可以多拿几次出来镜下观察状态,有大部分飘起来了就可以通过晃动摇下来剩下的。
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问
贴壁细胞传代相关问题?
bamboopiggy
建议把细胞传稀点,然后只换液,不传代,看细胞状况是否有改善
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问
原代平滑肌细胞很难穿过transwell小孔的原因
Eason老歌迷
是不是培养时间过短,记一下时,然后看看延长时间后的效果
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问
细胞冻存使用培养液可不可以
Guoood
用10%DMSO的全培冻存细胞就可以了,如果细胞比较珍贵也可以用纯血清冻存,而且还可以考虑用商品化的冻存液也有不错的效果。全程保持无菌操作,不需要加抗生素。
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问
细胞冻存放置于负80度冰箱一般能够保存多久?
未来9
肿瘤细胞一般在添加冻存液保存的情况下可以在-80度保存3个月内存活率一般可在80%以上,6个月以上大部分肿瘤细胞的存活率就会降低很快,即使复苏出来细胞是活着的,但是活性也会很低,对细胞状态影响很大。如果需要长期保存,最好是储存于液氮中,
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问
请问原代小胶质细胞的提取是只能从乳鼠的大脑提取嘛?成年鼠的大脑可以吗,还是成年鼠的脊髓?
Eason老歌迷
一般是从乳鼠的大脑皮层提取。当然可以从成年鼠的大脑中提取,你一查文献就能看到,介绍了很多种方法,比如说Calvo, Belen在IBRO Rep 2020 Jun对解离方法和基于Percoll的分离进行比较过分析。
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问
细胞培养碰上支原体污染该怎么办
此用户已注销
支原体污染细胞后,有必要清除支原体,常用方法有:1)对于非重要的细胞,如培养中的细胞、WCB的细胞等,将培养物与用过的培养基灭活后丢弃即可。对于较为重要的细胞,如来源珍贵或实验室中细胞保藏量较小等可以采用以下(2)-(8)的方法。2)用MRA处理:用支原体清除剂处理细胞,作用浓度为 25μg/ml,两周可以清除支原体。3)用清洗纯化法清除支原体污染的方法:细胞营养驯化→优质细胞群的筛选→细胞清
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问
猪肺原代巨噬细胞适合什么培养基,1640还是高糖
bamboopiggy
巨噬细胞一般算悬浮细胞,适合用1640养
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问
细胞增殖检测方法的选择?
一个小哭包
总结来说,MTT法和CCk-8法适用于所有细胞。但如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不是很高,从经济角度可以选择MTT法。如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求灵敏度非常高,并且希望非常便捷,在研究经费许可的条件下,建议选择使用CCK-8法。
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