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        基因敲除载体的构建

        相关实验：基于 CRISPR／Cas9 系统的动物基因敲除技术

        user-title

        dxy信

        先将将3个目的基因分别双酶切之后用T4 DNA连接酶连接之后再连接到载体上，还是将3个片段依次连接到载体上好？

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        4 个回答

        user-title

        vlinine

        有帮助

        觉得先将3个目的基因分别双酶切之后用T4 DNA连接酶连接之后再连接到载体上

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        实验手册上写的是分别酶切再连接，实验老师讲解的时候说可以依次连接，但如果你实验后边还有实验就不建议，会影响后续步骤进行

        user-title

        灵枢天问

        有帮助

        都可以，看你载体大不大，三个目的基因连一起也可以，但是为了实验的严谨性每一个连载体都可以作为对照

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        应该是分别将三条基因片段以及载体分别酶切，再用t4连接酶将3条片段分别连接到载体上

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