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科研学霸天团,48小时有问必答
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小鼠骨髓DC细胞培养,求大神帮忙看看🙏🏻
土井挞克树
感觉有镜下有细菌细胞,你培养基是清澈的吗
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求问小鼠胰腺、胰尾位置,以及胰腺RNA提取及胰岛分离方法
天雨心晴
胰腺胃的后面,靠近十二指肠和胆总管的为胰头,其远端则为胰尾 。
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大鼠脑冰冻切片尼氏染色杂质
土井挞克树
应该是杂质了,不过你这个不影响观察,可以继续使用
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请问菌液诱导完后怎么保存
墨幽染染
菌液诱导后放-20可以保存一段时间,当然最好还是放在-80或液氮中保存,下次做的时候拿出来融化,然后再离心处理就可以了,对WB结果基本没有影响
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northern blot 内参探针
Dr_劉医生
对呀,和跑DNA的southern blot基本一样,在数据库检索序列片段,看外显子位置;但因为northern做的RNA是单链,需要和互补的RNA探针引物结合;所以在做northern的时候最好选择cDNA探针,若选用DNA探针,则尽量设计在外显子部分。此外, 探针长度最好在100-1000bp之间,大于1000bp则背景很高,很难区分异源序列
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ELISA 洗板的时候枪头混用了是不是会影响结果
燚s6YUV
会影响结果的。加样的时候枪头肯定不能混用,然后加工作液的时候也不要接触孔壁,加洗涤液的时候一般我们都是用排枪,也是枪头不重复使用的。
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小鼠骨髓干细胞-全骨髓法,骨片法,求助!
Dr_劉医生
首先你P0原代就出现问题,是不是考虑骨髓取材的部位?当然密度梯度离心法也可能导致细胞流失;现你换了贴壁分离的方法,依旧没看到,所以我还是倾向于骨髓组织取材制备的问题;最后那个传代建议使用胰酶浓度为0.05%进行消化。消化每t25培养瓶加胰酶1ml。消化时间约1-2min内,t25培养瓶培养液约7ml完全培养基。
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目前肿瘤药物开发领域最新进展
piperer
肿瘤耐药细胞株原位接种成模的没做过,买成品株比较方便
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ChIP实验超声步骤问题求助
六月的雪是肚饿
您好,请问您解决了吗?我也是条带很小,未超声也有小的条带
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细胞荷瘤相关问题
bamboopiggy
H226是肺癌细胞系,ovcar-3是卵巢癌细胞系,你可以试试提高细胞数量,一般5-10x10^6试试
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T细胞活化
土井挞克树
首先回答第一个问题,平底的板子肯定没有问题。二,活化方面,首先你要保证你的抗体包被没有问题。抗体包被用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体(克隆号:145-2C11)稀释至 5μg/ml,稀释后的抗体加入到 24 孔板中,每孔 400μl,4°C 包被过夜。(注:板子在加入抗体之前,先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍,避免干孔);抗体包被不行肯定影响实验结果其次细胞刺激(次日)扩增
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单克隆抗体
灵枢天问
你是用的小鼠么。换一个好一点的分离液,然后整体操作一定要快,分离液很容易挥发,小心吸取你要的细胞层,这样杂质会少很多
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问
absin gp91 ds-tat
土井挞克树
储存方式:-20°C溶解方式这个可以查一下用该试剂做的文章,文章里一般有写
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问
哪位同学知道内质网应激检测指标的磷酸化位点吗
土井挞克树
PERK活化后能够特异性地磷酸化eIFZα的51位的丝氨酸,这个位点可以被检测到
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问
FITC 标记二抗以合适浓度稀释于 PBS,一般浓度是多少啊?
Dr_劉医生
二抗的常用范围是1:1000~1:5000,我一般用2000的就够了,具体可以看下试剂盒说明书
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问
石蜡切片为什么组织有裂纹
dxy_r1dvnb49
组织太脆了,建议调整一下固定时间
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问
用免疫荧光方法做组织切片用甲醛固定可以吗?
天雨心晴
不能,用多聚甲醛可以,注意别用错了。
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问
求助!!!大鼠下丘脑免疫组化切片有相关定位软件吗??
灵枢天问
软件不晓得,有一本书人卫出的,叫《大鼠脑立体定位图谱》可以参考
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求助大鼠阴道生理盐水涂片镜检
此用户已注销
不是结晶,有可能是真菌,仔细看看,放到400X下看。还有观察两天,如果出现增多的情况,100%是真菌污染。
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免疫组化片子有不规则泡泡
灵枢天问
我觉得是你脱水不彻底,是不是无水乙醇时间久了。换新的试一下
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