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问
计数菌落时用LOG10表示,是怎么表示的呢?
idiotOC0P
就用记号笔点了一个一个数的,小技巧可以在平板上画个十字分区域数。然后由于要乘以稀释倍数,最后得到的菌落数量肯定是比较大的,用Excel记录了数据然后log一下就得到了这些数据
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问
T细胞活化
土井挞克树
不需要别的刺激,CD3 、 CD28 的抗体刺激T 细胞,模拟体内 T 细胞活化的双信号作用,是目前体外进行 T 细胞激活与扩增应用最广泛的方法
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问
小鼠腹腔注射1mg/kg,怎么配成注射的溶液体积?
bamboopiggy
先看你药物的说明书,只要你药物的干粉可以放-80,你用dmso溶解后,就可以放-80
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问
wb做出来的内参为啥是这样的,一抗加了15000:1,二抗也是15000:1,图一是GAPDH,图二是his3
申东熙老伯
his3看着还可以,内参背景脏可能是没封闭好,建议封闭的时候一张膜一张膜分开封闭,避免让两张膜叠在一起,洗膜的时候也是。
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问
请问大家CHIP-qPCR的结果怎样判定为阳性啊?下面是我的各组的CT值,这样算是阳性吗?
bamboopiggy
你首先要看你melt curve对不对,然后再对比ct值。比的是binding site和non-binding site
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问
想请教大家提取miRNA的时候更倾向于选择茎环法还是加尾法?
Dr_劉医生
两种方法都是miRNA反转的主流方法;茎环法,特异性略好,但每个miRNA都需要单独设计对应的茎环引物,较为繁琐。比较适合从多种样本检测单一miRNA。而polyA加尾法一次处理,可逆转录全部miRNA,只需设计后续特定的miRNA定量引物,即可选择性扩增想要miRNA。这个方式的通用性高,而且适合高通量检测。在miRNA的初步筛选中,加尾法方式较为优。当然经济,方便不在话下。所以看你具体目的
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问
实验小白,请问石蜡切片做免疫组化需要稀释tritonx100透膜吗?
bamboopiggy
你都把细胞切开了,就不需要透膜了
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问
【求助】BV-2活化状态
汤姆卜丽波
感觉还是非激活态,再过6小时看看
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问
小鼠骨髓DC细胞培养,求大神帮忙看看🙏🏻
土井挞克树
感觉有镜下有细菌细胞,你培养基是清澈的吗
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问
求问小鼠胰腺、胰尾位置,以及胰腺RNA提取及胰岛分离方法
天雨心晴
胰腺胃的后面,靠近十二指肠和胆总管的为胰头,其远端则为胰尾 。
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问
大鼠脑冰冻切片尼氏染色杂质
土井挞克树
应该是杂质了,不过你这个不影响观察,可以继续使用
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问
请问菌液诱导完后怎么保存
墨幽染染
菌液诱导后放-20可以保存一段时间,当然最好还是放在-80或液氮中保存,下次做的时候拿出来融化,然后再离心处理就可以了,对WB结果基本没有影响
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问
northern blot 内参探针
Dr_劉医生
对呀,和跑DNA的southern blot基本一样,在数据库检索序列片段,看外显子位置;但因为northern做的RNA是单链,需要和互补的RNA探针引物结合;所以在做northern的时候最好选择cDNA探针,若选用DNA探针,则尽量设计在外显子部分。此外, 探针长度最好在100-1000bp之间,大于1000bp则背景很高,很难区分异源序列
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问
ELISA 洗板的时候枪头混用了是不是会影响结果
燚s6YUV
会影响结果的。加样的时候枪头肯定不能混用,然后加工作液的时候也不要接触孔壁,加洗涤液的时候一般我们都是用排枪,也是枪头不重复使用的。
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问
小鼠骨髓干细胞-全骨髓法,骨片法,求助!
Dr_劉医生
首先你P0原代就出现问题,是不是考虑骨髓取材的部位?当然密度梯度离心法也可能导致细胞流失;现你换了贴壁分离的方法,依旧没看到,所以我还是倾向于骨髓组织取材制备的问题;最后那个传代建议使用胰酶浓度为0.05%进行消化。消化每t25培养瓶加胰酶1ml。消化时间约1-2min内,t25培养瓶培养液约7ml完全培养基。
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目前肿瘤药物开发领域最新进展
piperer
肿瘤耐药细胞株原位接种成模的没做过,买成品株比较方便
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ChIP实验超声步骤问题求助
六月的雪是肚饿
您好,请问您解决了吗?我也是条带很小,未超声也有小的条带
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细胞荷瘤相关问题
bamboopiggy
H226是肺癌细胞系,ovcar-3是卵巢癌细胞系,你可以试试提高细胞数量,一般5-10x10^6试试
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T细胞活化
土井挞克树
首先回答第一个问题,平底的板子肯定没有问题。二,活化方面,首先你要保证你的抗体包被没有问题。抗体包被用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体(克隆号:145-2C11)稀释至 5μg/ml,稀释后的抗体加入到 24 孔板中,每孔 400μl,4°C 包被过夜。(注:板子在加入抗体之前,先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍,避免干孔);抗体包被不行肯定影响实验结果其次细胞刺激(次日)扩增
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单克隆抗体
灵枢天问
你是用的小鼠么。换一个好一点的分离液,然后整体操作一定要快,分离液很容易挥发,小心吸取你要的细胞层,这样杂质会少很多
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