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        T细胞活化

        相关实验:B 细胞的活化

        user-title

        dxy_e86hxap4

        请问用CD3 CD28活化T细胞,该怎么操作呢,如果要把 anti-CD3包被在培养板上,是用普通平底培养板就可以吗?如果两种都直接添加,效果怎么样?我之前5ng/ml CD3和3ng/ml CD28效果不明显,求赐教

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        首先回答第一个问题,平底的板子肯定没有问题。

        二,活化方面,

        首先你要保证你的抗体包被没有问题。抗体包被
        用无菌 PBS 将 anti-mouse CD3 抗体(克隆号:145-2C11)稀释至 5μg/ml,稀释后的抗体加入到 24 孔板中,每孔 400μl,4°C 包被过夜。(注:板子在加入抗体之前,先用无菌 PBS 润洗 2-3 遍,避免干孔);抗体包被不行肯定影响实验结果

        其次细胞刺激(次日)
        扩增培养基成分:RPMI1640 + 10% 血清 + 5ug/ml anti-mouse CD28(克隆号:37.51) + 双抗
        1. 将细胞浓度调整至 1-2×10^6/ml(本次实验为 2×10^6/ml,该浓度偏大);
        2. 从 4°C 冰箱取出前一天包被的板子,弃掉包被液,无菌PBS洗涤3遍;
        3. 每孔加入 500μl 细胞悬液,放置于 37°C 含 5% CO2细胞培养箱中培养。

        这是一般常规的方法,供楼主采纳

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        用普通平底培养板就可以了哟、如果两种都加可能好点

        user-title

        灵枢天问

        有帮助

        你可以浓度稍微高一点,分开包被两个再合起来包一个做一个预实验

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