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问
确定启动子核心区域,做了截短体
huarenqiang5
如果这个启动子不是组织特异性的启动子,就没有太大的问题。
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问
磁珠分选小鼠脾脏来源的Treg细胞,培养扩增结果不好,不知道哪里出来问题
juyue2010
分选出的免疫细胞,初始接种密度非常关键,
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问
非编码序列
huarenqiang5
RNA聚合酶II型启动子、慢病毒载体、腺病毒载体、AAV载体和piggyBac等载体。
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问
如何设计Keap1基因的MSP或BSP引物
huarenqiang5
(1)引物结合位点应该在原始序列中包含4个以上胞嘧啶来确保转化后的DNA的特异性。(2)BSP引物不应包含CG二核苷酸,长度在25-30bp较为合适;MSP引物因为往往具有较高的GC比,长度应适当缩短。(3)扩增片段一般认为不要超过650bp,以保证PCR的效率。(4)对于MSP引物,应该包含3-5个潜在可甲基化位点,且引物的3端应该是一个潜在的可甲基化胞嘧啶,以得到最大化的特异性。(5)MSP中
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问
求助MTT问题
balalaLy
加mtt之前有没有看一下细胞情况?加DMSO之前有没有明显的结晶沉淀?如果细胞数量少,结晶少,颜色是会很淡,延长一下DMSO溶解的时间。
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问
如果在大肠杆菌转化时候用枪头涂板,不小心划了很多划痕,会对结果有什么影响吗?
土井挞克树
会影响菌落的生成,还可能影响菌落的分离。
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问
单抗细胞大量死亡找原因
sswei
可能是由于细胞本身传代时间过长和培养基质量的原因
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问
biomarkers in medicine 投稿
医学生小李233
长时间没进展的话,可以给编辑部发邮件问问
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问
求问CFU-E的表面标志物是什么
huarenqiang5
应用转铁蛋白-Sepharose 4 B亲和层析分离CFU-E
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问
【求助】外周血白细胞DNA提取
huarenqiang5
不是DNA,建议重新滤过后观察
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问
求助!求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol
土井挞克树
做RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染、RAW264.7细胞形态不好时的处理方法1.倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。2.把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴
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问
动物血脑屏障IGg渗漏试验
huarenqiang5
一抗即可,二抗免疫组化试剂盒里面有。
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问
肺转移灶白光下拍照怎么把转移灶拍得清晰一点
huarenqiang5
保证背景足够亮,拍摄时手机要摆正并且与片子平行,对好焦距。注意手机灯光位置,避免在胶片上形成明显的反光,不要抖动,手需放稳。选择有高清晰度摄像头的手机进行拍摄。
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问
脾脏石蜡切片
huarenqiang5
固定时间建议在48小时左右,中间可以更换1~2次新鲜固定液;清洗时建议用pbs。
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问
求助!弧菌药敏试验的判断标准!
huarenqiang5
弧菌药敏试验的判断标准一般是通过弧菌环直径大小。
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问
提取人中性粒细胞
Dr_劉医生
国内的话碧云天的试剂盒就行,用抗凝管抽血样
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问
#噬菌斑长得糊
土井挞克树
也是嗜菌斑,考虑是宿主浓度过高
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问
近视方面可以做细胞模型吗?
土井挞克树
有动物模型,但是单个细胞的模型是没有的。
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问
为什么平时的细胞实验缓冲液中不添加钙镁离子,而在免疫荧光实验中,固定过程洗涤过程中,需要添加钙镁离子
且行且尽力
因为细胞实验中钙离子和镁离子会影响胰酶的消化能力,导致胰酶消化能力下降,培养细胞时,消化的细胞数量有限,加上细胞的密度依赖性,所以细胞培养时最好使用不含有钙镁离子的PBS 缓冲液。
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问
求助|用RANKL诱导raw破骨,TRAP染色,到底长啥样的是破骨细胞哇
土井挞克树
用RANKL诱导raw破骨细胞形态见下图。
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