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        求助!求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol

        相关实验:小鼠腹腔巨噬细胞分离及纯化

        user-title

        甜味玻璃碴

        组里面没有师兄师姐做双染,所以来这里寻求有经验的师兄师姐帮下忙😢拜托拜托😭

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        1 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        做RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染、RAW264.7细胞形态不好时的处理方法

        1.倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。
        2.把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。
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