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        请教各位转染CRISPR文库慢病毒的问题

        相关实验:细胞转染

        user-title

        liverpool睿

        最近在转CRISPR文库,大部分文献都是建议用低MOI(-0.3MOI)转染,请问各位大佬,对于一个MOI本身就很高的细胞,病毒浓度低了怎么样都转染不进去,只有两种细胞 这两细胞MOI都很高50 100,怎样转染才好,谢谢!

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        5 个回答

        user-title

        juyue2010

        有帮助

        对于每一种细胞,都有自己合适的MOI,这里说的0.3MOI是指病毒感染后30%细胞阳性。

        user-title

        sswei

        有帮助

        提高病毒浓度或改用降低M0l来做实验。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        既然降低了MOI转不进去,就用原来的MOI值转吧,可以尝试降低作用时间

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以换moi中度的细胞进行转染,太高moi的话失败率肯定很高。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果目标细胞本身的MOI已经很高,那么使用低MOI来转染的确可能会导致转染效率过低。在这种情况下,可以考虑采取以下措施来提高转染效率:

        使用高浓度病毒:可以尝试增加病毒的浓度,使其在短时间内更充分地与细胞接触,从而提高转染效率。

        优化转染条件:可以尝试优化转染条件,例如增加转染时间、改变转染温度、使用其他的转染试剂等,来提高转染效率。

        联合使用多种转染方法:可以考虑同时使用多种转染方法,例如病毒转染、电穿孔、化学转染等,来提高转染效率。

        选择合适的细胞状态:可以尝试在目标细胞处于较为适合转染的状态时进行转染,例如处于对某种激素或细胞因子的刺激下,或处于增殖期等。

        需要根据具体情况进行调整,有些细胞的确很难转染,需要反复尝试不同的方法和条件来找到最适合的转染方法。

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