- ￥100
- Thermo Fisher
- 美国
- AM4510M
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2~8℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
siPORT™ NeoFX™ Transfection Agent
- 库存：
50
- 供应商：
北京百奥创新科技有限公司
- 规格：
400 µL
•通用—可与广泛的细胞系配合使用
•可重现—产生一致的批间、板间和孔间结果
•高效—以高 siRNA 转染效率执行，允许使用低 siRNA 浓度，以尽可能降低非特异性效应
•快速—铺板时可快速反向转染细胞，节省一天时间
基因沉默实验通常需要关键但是耗时的优化实验。siPORT™ NeoFX™ 转染剂细化了 siRNA 转染实验方案，导致优化减少。从开始到结束，成功的基因沉默实验可在 24 小时内完成。这种简化的实验方案可以适应广泛的细胞和实验设计，包括高通量应用。
铺板时可快速反向转染细胞，节省一天时间
只需将 siPORT™ NeoFX™ 添加到稀释的 siRNA 中，进行孵育以形成转染复合物，之后将复合物添加到培养物孔中，并覆盖细胞。这种新的简化实验方案称为 “neofection”，与传统的铺板转染程序相比，将为研究人员节省一整天宝贵时间。即使在存在血清的情况下，转染复合物仍具有活性和稳定性，因此无需在转染后去除或更换培养基。
针对低 siRNA 浓度和高重现性进行了优化
最近的报告表明，siRNA 浓度为 100 nM 或更高可导致哺乳动物培养细胞中基因表达发生非特异性变化（脱靶效应）。将用于转染的 siRNA 量减少至 1–20 nM 可将这些非特异性效应降至最低，同时仍可提供广泛的靶基因沉默。siPORT™ NeoFX™ 转染剂可高效转染低浓度的 siRNA。此外，该试剂在用于重复样品的多个孔和不同批次转染剂之间提供了高性能。
与广泛细胞系兼容
该制剂已成功用于将 siRNA 递送至多种细胞类型，包括 MCF-7（人乳腺癌）、HT-29（人结直肠腺癌）、HeLa-S3（人宫颈腺癌）、HeLa（人子宫颈腺癌）、HepG2（人肝细胞癌）、BJ（人包皮成纤维细胞）、A549（人肺癌）、UMR106（大鼠骨肉瘤）、SKOv3（人卵巢癌）和 SKNAS（人骨髓成神经细胞瘤）。
辅助产品：
siPORT™ 也可提供胺转染剂（SKU# AM4502 和 AM4503），一种聚胺试剂。为检测哪种转染剂适合您的系统，建议使用 Silencer™ siRNA 转染 II 试剂盒 (SKU# AM1631)。它包含两种不同的转染剂以及用于转染优化的对照品。
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文献和实验到细胞完全从壁上脱落下来为止。 （4） 加入1ml的含血清培养基终止反应。 （5） 用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。 （6） 将培养液装入离心管中，1000rpm离心5min。 （7） 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。 （8） 将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。 （9） 将培养皿转入CO2培养箱中培养，第二天转染。 2、细胞转染 （1）转染试剂的准备 A. 将400ul去核酸酶水加入管中
细胞转染的方法主要有三种，分别是磷酸钙-DNA 共沉淀法、DEAE-葡聚糖转染、脂质体介导 DNA 转染法，今天师兄就先从磷酸钙-DNA共沉淀法讲起。 磷酸钙-DNA共沉淀法 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使 DNA 附在细胞表面，这回利于细胞吞入摄取核酸，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA，仅有1%～5%可以进入细胞核中，其中仅有不到1%的DNA可以与细胞 DNA 整合，在细胞中进行稳定表达，基因转导的频率大约为10-4，这项技术
等）。上述方法中，实验室最常用的方法当属是脂质体转染（质粒转染）。 质粒转染操作简单，分为瞬时转染和稳定转染。针对不同属性细胞系，选择转让方式时要做足功课，千万不要图方便，否则转染效率简直崩溃。影响转染效率的因素有很多，比如准备不充分、转染条件不佳；再比如细胞株本身的特性和活性、细胞污染，转染的DNA/RNA的质量，转染方法，转染试剂的选择等，小编总结了这11个注意事项，一起来学习吧！ 01血清条件下的细胞转染 转染可以使用血清，前提是DNA-阳离子脂质体复合物形成时不含血清，否则会降低转染
