• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        【求助】请教各位前辈们关于AKT/PKB 的问题

        丁香园论坛

        1322
        想问一下

        我想研究一种细胞的过度凋亡是不是与AKT/PKB 下调有关,那我检测一下AKT 的 mRNA,及AKT ,P-AKT 的表达量,这样的思路有没有问题?

        我是一只小菜鸟,还没开始做实验,最近看这方面的文献看的脑袋混乱了

        旁观者清,请大家帮我分析一下有没有可行性

        小妹在此谢过了
        这个想法行不通吗?

        求指教
        谈谈我的看法

        楼主想要验证细胞凋亡途径中是否有Akt/PKB参与

        首先要确认你的细胞在某种刺激下是否发生凋亡,先用几个凋亡指标如:caspase-3,PARP protein或者TUNEL stain确认下。

        在发生凋亡的基础上,再检测如楼主所设想的Akt mRNA水平及Akt蛋白水平表达量和Akt 磷酸化水平表达量。

        如果Akt的某种水平上表达量有变化,只能说在在细胞凋亡途径中Akt参与,但不能说明Akt与细胞凋亡途径的上下游关系。

        所有建议楼主使用Akt的inhibitor来证明最好。

        以上是我个人一点想法,good luck!
        rarazhuzhu wrote:
        谈谈我的看法

        楼主想要验证细胞凋亡途径中是否有Akt/PKB参与

        首先要确认你的细胞在某种刺激下是否发生凋亡,先用几个凋亡指标如:caspase-3,PARP protein或者TUNEL stain确认下。

        在发生凋亡的基础上,再检测如楼主所设想的Akt mRNA水平及Akt蛋白水平表达量和Akt 磷酸化水平表达量。

        如果Akt的某种水平上表达量有变化,只能说在在细胞凋亡途径中Akt参与,但不能说明Akt与细胞凋亡途径的上下游关系。

        所有建议楼主使用Akt的inhibitor来证明最好。

        以上是我个人一点想法,good luck!

        谢谢rarazhuzhu的分析

        凋亡指标是要做的

        加inhibitor的话,对实验设计来说是更严谨,但是就是担心实验难度和周期的问题
        yuanyuan_626 wrote:
        谢谢rarazhuzhu的分析

        凋亡指标是要做的

        加inhibitor的话,对实验设计来说是更严谨,但是就是担心实验难度和周期的问题

        增加了难度 但更能说明问题

        如果避开不做的话 那么等到投杂志社时 肯定要让你追加实验的 要是到这个时候才更加头疼

        总之 实验中为了达到目的 即使难度大也要做,即使要花多点时间也要做,这就是变相的节约时间。

        最后 祝good luck~
        yuanyuan_626 wrote:

        我想研究一种细胞的过度凋亡是不是与AKT/PKB 下调有关,那我检测一下AKT 的 mRNA,及AKT ,P-AKT 的表达量,这样的思路有没有问题?
         


        Akt 作为 anti-apoptotic 信号蛋白,近几十年来被很多团队研究着。

        那么,你的研究的创新点是什么?
        chuckdouble wrote:
        Akt 作为 anti-apoptotic 信号蛋白,近几十年来被很多团队研究着。

        那么,你的研究的创新点是什么?

        创新点不在于Akt 而是我想研究的那个模型 现在似乎是没有人发过这类的文章,我想这也算的上是点创新吧?

        没接触过实验,目前处于空想构思阶段,所以把实验想的好像有点过于简单
        rarazhuzhu wrote:
        增加了难度 但更能说明问题

        如果避开不做的话 那么等到投杂志社时 肯定要让你追加实验的 要是到这个时候才更加头疼

        总之 实验中为了达到目的 即使难度大也要做,即使要花多点时间也要做,这就是变相的节约时间。

        最后 祝good luck~

        可是啊 我大概只有一年的实验时间,目前没有读博的打算,所以想做个简单点的

        yuanyuan_626 wrote:

        我想研究一种细胞的过度凋亡是不是与AKT/PKB 下调有关,那我检测一下AKT 的 mRNA,及AKT ,P-AKT 的表达量,这样的思路有没有问题?
         

        创新点不在于Akt 而是我想研究的那个模型 现在似乎是没有人发过这类的文章,我想这也算的上是点创新吧?

        没接触过实验,目前处于空想构思阶段,所以把实验想的好像有点过于简单


        原来是这个意思。

        你想问的应该是: 我想用A模型刺激出细胞的凋亡是否与Akt有关,是吧?
        chuckdouble wrote:
        原来是这个意思。

        你想问的应该是: 我想用A模型刺激出细胞的凋亡是否与Akt有关,是吧?

        恩 是的,这样说更清楚,谢谢啊

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        【求助】请教各位前辈们关于AKT/PKB 的问题

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序