• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        MOVAS(小鼠主动脉血管平滑肌)细胞用siRNA转染效率如何?

        相关实验:细胞转染

        user-title

        xuweijia

        MOVAS(小鼠主动脉血管平滑肌)细胞用siRNA转染效率如何?

        wx-share
        分享

        5 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        siRNA转染效率一般不高,如果技术好的话可以提高效率。

        user-title

        xuweijiauser-title

        您的“技术好”是怎么个操作?能不能详细分析一下?

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        siRNA 转染效率是指在细胞中成功表达 siRNA 的比例。它取决于多种因素, 包括:

        细胞类型: 不同类型的细胞对 siRNA 的敏感性和吸收能力不同, 因此转染效率也会有所差异。

        转染方法: 不同的转染方法, 如静电转染, 微量管转染, 动力转染等, 对转染效率的影响也不同。

        siRNA 的设计和质量: siRNA 的碱基配对, 碱基长度, 完整性等因素都会影响其转染效率。

        转染条件: 如细胞密度,细胞周期,转染时间,温度等条件也会影响转染效率。

        因此,对于 MOVAS (小鼠主动脉血管平滑肌) 细胞而言,具体的 siRNA 转染效率需要进一步的研究来确定, 并且根据不同研究条件和方法可能会有所差异。

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        细胞状态好的话转染效率还可以的。

        user-title

        xuweijiauser-title

        您转染这个细胞的时候铺板密度是多少?做qPCR和WB的时间点是什么时候?,

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        转染效率还可以,当然我要看转染技术咋样

        user-title

        xuweijiauser-title

        能详细解释一下吗?

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        siRNA转染效率低,原因如下:

        1. siRNA与转染试剂比例不佳
        由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。
        2. 细胞密度不佳
        调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高。由于siRNA沉默时效性的影响,转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测,转染后48-72小时才能进行蛋白检测。如果转染时铺板密度较高,细胞一方面转染效果不理想,直接影响沉默效果和数据可靠性,另一方面,48小时甚至更长时间后,沉默检测最佳点时,过于密集的细胞将影响细胞状态,从而影响实验结果。
        3. siRNA效率不高
        选择最优RNA,并采用已知高效的RNA做对照。siRNA的合成需要注意的是一定要选用高纯度的siRNA,siRNA的纯度直接关系到转染效率和沉默效率。
        4.转染试剂不合适
        选择专门针对siRNA转染的试剂,如Entranster-R试剂。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序