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        蛋白表达 求助

        相关实验:蛋白表达体系构建

        user-title

        1Q11G

        pET系列载体 可以换启动子嘛 他只能用T7启动子嘛 实验室没有啥经济条件 但是我的表达菌株不能用T7 换了启动子 会不表达吗

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        3 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        为了实验能够成功建议用T7启动子比较好。pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏蛋白lacI的基因,在插入目的基因后,lacI是失活的。表达时是需要IPTG诱导的。

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        土井挞克树

        有帮助

        可以换启动子的,没有T7可以用别的启动子

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果你的表达菌株无法使用T7启动子进行表达,想要更换启动子可能会影响表达效率。

        在更换启动子时,需要注意以下几点:

        1. 启动子的强度:选择一个适当的启动子来替代T7启动子。确保选用的启动子具有足够的强度,能够在你的表达菌株中产生足够的目标蛋白表达。

        2. 载体兼容性:确保所选的启动子与DET系列载体兼容,并且可以正确组装。

        3. 序列匹配:验证更换的启动子与目标基因的序列是否匹配,以确保启动子与目标基因的连接正确。

        4. 启动子的调节性:了解所选启动子的调节性能。某些启动子可能对特定菌株具有较好的调控效果,而在其他菌株中可能不适用。

        请注意,更换启动子可能会导致表达水平的降低或变化。不同的启动子可能在不同的表达菌株中表现出不同的效果。因此,在进行更换启动子的实验之前,最好在相关文献中查找类似的实验。

        最好在实验之前进行小规模的预实验或对比实验,评估更换启动子后的表达效果。这样可以帮助你确定是否需要采取其他措施来提高表达效率,如优化培养条件、添加辅助蛋白或使用其他表达系统。

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