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        使用PLA检测蛋白质互作时需要对细胞进行通透处理吗?

        相关实验:蛋白质相互作用检测

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        雪格格619

        使用PLA检测蛋白质互作时需要对细胞进行通透处理吗?

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        3 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在使用PLA(Proximity Ligation Assay)检测蛋白质互作时,通常需要对细胞进行通透处理。这是因为细胞膜的存在可能会阻碍探针的进入,影响检测结果的准确性。

        常见的细胞通透处理方法包括甲醛或乙醛固定、冰乙酸/乙醇洗涤、Triton X-100或Digitonin等洗涤剂的处理,以及其他一些化学或物理方法。这些方法不仅可以通透细胞膜,还可以保持蛋白质的空间结构和互作关系,从而提高PLA检测的准确性和特异性。

        但是,对于一些特殊的蛋白质或细胞类型,可能不需要进行通透处理,或需要进行不同的处理方法。因此,在进行PLA实验之前,需要根据实验的具体要求和样品特点,选择合适的细胞处理方法,以获得更准确和可靠的检测结果。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        需要通透处理的,可以用含0.5%Tritonx100的pbs处理10-15min,然后再加入封闭液孵育

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        经过 4% 多聚甲醛固定后,可以使用0.2% TritonX-100透化。

        user-title

        雪格格619user-title

        0.2%的Triton X-100怎么配置呢?谢谢

        user-title

        此用户已注销

        取20ul Triton X-100加入100ml PBS中,然后37度水浴锅溶解

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