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        之前挑单菌落过夜培养后的菌液用甘油保存于-80℃,现在要做IPTG诱导的话,怎么做?

        相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

        user-title

        dxy_kcup4ug3

        是直接解冻后用接种环粘取划平板,还是先取解冻的甘油菌液于液体培养基过夜培养后,再去取菌液涂平板

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        3 个回答

        user-title

        juyue2010

        有帮助

        先过夜让菌恢复一下,再做诱导。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        (IPTG浓度)取100uL培养过夜的菌液接种到5mLLA液体培养液中,共接8管,37℃,200rpm振摇培养至OD600至0.6~08时,加入1M的IPTG,使IPTG终浓度分别为使IPTG终浓度分别为0,001,0.1,0.2,0.5,1,5,10mM,置37℃摇床继续培养4h,置4℃保存备用。

        另取不含外源基因片段的质粒pET-32a(+)转化BL21感受态细胞作相同处理,加IPTG诱导4h作为对照。样品处理后进行SDS-PAGE分析。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        最好是取解冻的甘油菌液于液体培养基过夜培养后,再去取菌液涂平板,这样得到的实验结果比较稳定。

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