用RIPA提取总蛋白为什么会有粘稠的不可溶沉淀？是什么？如何解决？

是ripa裂不掉的细胞碎片,可以通过高速离心除掉

这种物质可能是细胞核内DNA的释放造成的。

试试看下面的方法：

1.减少裂解液用量，同时刮细胞时尽量减少刮得次数使被机械性破坏的细胞减少

2.加入DNA酶

3.提完蛋白后，如发现黏黏的东西，把蛋白在95℃孵育10分钟，然后立即冰浴5分钟

可以使用柱式法蛋白提取真正意义上的总蛋白

产生粘稠物的主要原因是RIPA不能将所有样品全部裂解，产生的不可溶组分中主要含有核酸残团，细胞碎片（有些组织样品还含有油脂），和部分蛋白，因此RIPA提取的仅仅是可溶性蛋白，并非真正的总蛋白。