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- 免疫沉淀（IP）/免疫共沉淀（Co-IP）
- 武汉
- 2026年01月26日
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- 提供商：
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 服务名称：
免疫沉淀（IP）/免疫共沉淀（Co-IP）
- 规格：
视具体情况而定，详情请咨询
服务简介
免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是利用抗原抗体特异性反应纯化富集样品中目的蛋白的一种方法。通常使目标蛋白同抗体-protein A/G形成免疫复合物沉淀而得以收集，然后通过WB检测目的蛋白。
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CO-IP）是一种研究两种蛋白在体内是否存在相互作用的有效方法，通过抗体和已知蛋白结合，从而捕获整个已知蛋白复合物，进而研究复合物中与已知蛋白存在相互作用的蛋白。
服务流程
接收订单及样品--样品裂解液制备、定量--样品、抗体、protein A/G-凝胶孵育--沉淀收集、洗涤、制样--WB检测--结果交付
客户提供
1、需检测的样品，一抗（也可以选择由金开瑞提供）。
2、送样要求：
▶ 离体后迅速超低温处理并-80℃冻存的组织样品，干冰运输；
▶ 组织：动物组织不少于400 mg；植物组织不少于2 g；
▶ 细胞：2x10^7个细胞。
最终交付
WB胶片/照片及实验报告。
服务说明
| 服务项目 |
细分 |
服务周期（工作日） |
|---|---|---|
| 免疫沉淀 |
IP+WB |
15-20 |
| 免疫共沉淀 |
（CO-IP）+2*WB |
请咨询 |
| 免疫共沉淀-质谱鉴定 |
CO-IP+WB+MS |
案例展示
标签融合蛋白表达并免疫共沉淀，质谱鉴定寻找互作蛋白（转染293T细胞）
细胞核蛋白免疫共沉淀，WB验证蛋白互作
相关技术服务
● RNA pull-down ● RIP-qPCR ● DNA pull-down
相关资源
1、Co-IP的实验步骤
● 细胞提取：从细胞或组织中提取蛋白质，可以使用细胞裂解缓冲液来破裂细胞膜，并添加蛋白酶抑制剂和磷酸酯酶抑制剂来保护蛋白质的完整性。
● 抗体固定：将目标蛋白质的抗体与磁珠或琼脂糖小球等固相材料结合，形成抗体固定的材料。
● 免疫沉淀：将细胞提取物与抗体固定的材料一起孵育，使目标蛋白质与其结合伙伴形成复合物。
● 洗涤：将反应混合物进行多次洗涤，以去除非特异性结合的蛋白质和杂质。
● 洗脱：通过改变pH、离子强度或添加竞争剂等方式，将复合物从抗体固定材料上洗脱下来。
● 蛋白质分析：对洗脱的样品进行蛋白质分析，可以使用SDS-PAGE和免疫印迹等技术检测目标蛋白质及其结合伙伴的存在。
2、Co-IP的应用场景
● 揭示蛋白质复合物的组成和功能：Co-IP技术可以用于鉴定蛋白质复合物的组成和结构。通过选择特定的目标蛋白质作为抗体的靶点，可以将其与其他相互作用蛋白质共沉淀，从而确定蛋白质复合物的组成。这有助于理解蛋白质复合物在细胞内的功能、相互作用网络和信号传导通路。
● 研究信号传导和基因调控：Co-IP技术可用于研究蛋白质在信号传导和基因调控中的相互作用。例如，可以通过共沉淀实验来确定转录因子与DNA序列的结合，并揭示基因调控的机制。此外，Co-IP还可用于研究蛋白质激酶和底物之间的相互作用，从而了解细胞信号传导通路的调控机制。
● 鉴定疾病相关的蛋白质复合物：Co-IP技术可用于鉴定与疾病相关的蛋白质复合物。通过将目标蛋白质与疾病相关的样本共沉淀，可以发现与疾病发生和发展相关的蛋白质相互作用。这有助于理解疾病的发病机制、寻找潜在的治疗靶点，并为药物开发和治疗策略提供重要的线索。
● 蛋白质交互作用网络分析：通过大规模的Co-IP实验和蛋白质组学技术结合，可以构建蛋白质交互作用网络图谱。这些网络图谱提供了蛋白质相互作用网络的全貌，有助于了解细胞内蛋白质相互作用网络的结构和功能。这对于研究细胞过程、生物学调控和疾病机制等具有重要的意义。
3、与Co-IP技术相关的常见问题与解答
(1) Co-IP实验中如何选择合适的抗体？
▶ 选择具有高亲和力和特异性的抗体，最好是经过验证的商业抗体或有良好文献支持的自制抗体。
▶ 针对目标蛋白质选择不同的克隆，进行抗体特异性验证，如Western blotting。
▶ 进行预实验，评估抗体的适用性和效果。
(2) 如何优化Co-IP实验条件以提高效率和特异性？
▶ 优化提取和溶解条件，使用合适的缓冲液和洗涤液来提高蛋白质的溶解和纯化效率。
▶ 调整孵育时间和温度，以优化抗体与靶蛋白质的结合。
▶ 增加洗涤步骤，以去除非特异性结合的蛋白质。
▶ 使用阻断剂，如牛血清蛋白（BSA）或鱼精蛋白（Gelatin），减少非特异性结合。
(3) 如何解释Co-IP实验结果中的负面数据或低信号？
▶ 检查实验条件和步骤是否正确，如蛋白质提取、溶解、抗体结合等。
▶ 评估抗体的质量和特异性，进行抗体验证实验，如Western blotting。
▶ 重新评估目标蛋白质的表达水平，确定其是否充分表达。
▶ 检查Co-IP实验条件是否适当，可能需要调整抗体浓度、孵育时间等。
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文献和实验了一线技术支持常被问到的问题，希望这篇纯干货能帮助大家顺利升级打怪，早日驾驭 IP、co-IP。 IP、co-IP、pull-down 简介 IP（Immunoprecipitation），免疫沉淀：是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法 Co-IP（co-Immunoprecipitation），免疫共沉淀： co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本实验流程和IP类似，通过使用诱饵蛋白（IP 中的抗原，bait protein）特异
蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）对解析生命活动过程与疾病发生发展过程至关重要。随着时代发展，虽然大规模、高通量的生物学研究手段大大促进了蛋白质相互作用的预测，但这种预测还需要进一步利用体外和体内系统进行验证。分析蛋白质互作的方法多种多样，本篇文章为大家介绍以下几种互作分析技术： 免疫共沉淀 Co-IP 免疫沉淀 （IP）、免疫共沉淀 （Co-IP）和 pull-down 都是常用的从复杂的混合样品中获取目标分子，以进行下一步分析的方法，如检测蛋白质能否相互作用。在此类实验中，被研究的蛋白质称为
了编码 HA-BDCA-2 载体的小鼠 B 前体细胞后，提取的蛋白使用 SDS-PAGE 的方法进行检测。 蛋白免疫共沉淀（co-IP）与染色质免疫共沉淀（ChIP） μMACS Protein A/G MicroBeads 专为蛋白质免疫共沉淀分析而开发，免疫复合物 30 分钟即可形成并得到磁性分离。 在强磁场的分离柱中进行润洗，可保证背景充分去除，即便是弱结合的蛋白复合物依然可得到充分分离。传统免疫共沉淀工作流程需要抗体孵育过夜，相比之下 MACS Techology 可令实验时间缩短
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