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科研学霸天团,48小时有问必答
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同一条带曝光结果前后不一致
Eason老歌迷
同一张膜,本人可以在成像的时候,做出完全不同的图片结果。显色液的滴加,量,以及曝光时间,条带颜色(要求灰色而不是黑色)。所以最好有图片说明问题。
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问
为什么做COIP的时候 IP组会有多条条带?
此用户已注销
加入的A蛋白抗体和IgG 抗体,在最后一步的煮样中,被β巯基乙醇破坏了结构,变成了重链和轻链,随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同,又被你的B蛋白抗体识别出来,所以显影就出现了条带。
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问
文献里已知检测限0.5amol,如何计算转化成拷贝数/ml呢?
Eason老歌迷
计算公式为6.02 x 10(23)) x (ng/ul x 10(-9) ) / (DNA length x 660) = copies/ul。如果DNA/RNA的量是ng/ul,那么拷贝数(copies/ul)=[(ng数×10的-9次方)×(6.02×10的23次方)]÷(碱基数×345)例:3000 碱基质粒,浓度100 ng/ul ,MW= 3000 bp x 660 dalton/bp
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问
这个月一直跑western,一直出不来结果
此用户已注销
一、Western Blot实验条带没出现的原因分析及解决办法 :原因分析 解决办法 1. 一抗和二抗失效 1. 更换抗体;选择现用现配的工作液2. 2.一抗和二抗不匹配 2. 更换为同种同属的同亚型的抗体底物3. 3.发光液失效 3. 更换新的发光液4. 4.抗体染色不充分 4. 增加抗体浓度;延长孵育时间5. 5.被测样品中不含有目的蛋白质或者目的 蛋白质含量太低 5. 设置阳
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问
wb条带形状很奇怪,呈梭形或船形,请问该怎样解决呢?
申东熙老伯
梭形或船形可能是配胶没配均匀,也可能是样品盐浓度过高,电泳的时候可以先用10-15min用20V低电压跑十几分钟让盐分离。
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问
配胶有气泡
huarenqiang5
这种情况可能是凝胶过慢导致的,可以提高TEMED浓度,加入浓缩胶立即插梳子试试,
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问
请问大家有养间充质干细胞的吗?用什么血清啊
红嘴小花猫
Ultroser G 血清替代品是一种无血清添加剂,设计用于直接替代现有实验方案中的胎牛血清FBS
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问
蛋白免疫印迹,条带很细是怎么回事?
huarenqiang5
考虑是否是胶或抗体的浓度问题?
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问
条带没曝出来
申东熙老伯
分开曝光,一条一条曝,至少要看到趋势。
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问
代谢组学
此用户已注销
做这种代谢组学能纵向比较,比如不同发酵时间做代谢物的比较。还有样品的处理淬灭是取样后立马进行
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问
蛋白电泳完成去吃饭了,2h后回来才转膜,或者转膜完成,去干啥了回来才封闭。中间停留时间有没有影响?
Eason老歌迷
没啥太大影响。放那就行,别太长时间,我之前经常总这样。
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问
在污水处理时,如果用赤泥催化实验,那么赤泥中的其他有害物质该怎么处理才能尽量无害排放呢?
土井挞克树
赤泥可以用固硫剂CaO,可以做除硫剂,吸取烟雾中的SO2。形成的新物质酸碱中和,排放没有污染。
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问
COIP IgG组有明显的条带是怎么回事?
bamboopiggy
换另外一种二抗的IgG,是非特异性结合
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问
用BCA法测胶原蛋白浓度,562nm处的OD值很低,但是跑电泳有条带,这是正常现象吗?
balalaLy
有可能测OD值有误差,能跑出条带不就行了?
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问
冰冻切片HE染色
麻黄连翘赤小豆
可以,细胞核细胞质都染的明显能分辨,边界清晰
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问
小鼠活体成像结果怎么分析
Eason老歌迷
有特有的图像处理软件。比如说动物断层扫描仪(micro CT)进行IVIS活体成像系统荧光定量分析。
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问
求助|关于CB2R的wb实验条件
土井挞克树
这个还是与抗体有关,抗体的质量不够,联系抗体相关人员。
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问
WB杂带在蛋白预测大小位置及更大的位置都有,怎么选择条带?
Dr_劉医生
说明存在多条带的情况,蛋白可能存在降解,一般选预测大小最靠近的那条
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问
meta分析用Engauge Digitizer提取的数据有负值,粘贴到提取HR的Excel转换表中出不来HR
Dr_劉医生
生存曲线有负值的话,就只提取基线特征来扩大样本量,效应值HR就不需要提取了
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问
二元逻辑回归
Dr_劉医生
1.所有变量一起放进分析2. p<0.05说明年龄是有统计学意义的单变量,年龄分组后,编码2、3都不显著,说明年龄作为亚组分析,各年龄段的组间比较没有统计学意义
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