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        蛋白电泳完成去吃饭了,2h后回来才转膜,或者转膜完成,去干啥了回来才封闭。中间停留时间有没有影响?

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        n0y0j7

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        9 个回答

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        Eason老歌迷

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        没啥太大影响。放那就行,别太长时间,我之前经常总这样。

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        土井挞克树

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        停留几小时内是没问题的,不过夜问题不大。

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        NatureBios

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        电泳跑完不能及时的转印,胶里面的蛋白会有自由扩散,后面做显影会有些弥散的现象,转膜完成后隔短时时间操作,影响小一些,不过实验进程还是应该按照sop去做,减少体系的不稳定性和变量,能得到更好的实验结果

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        此用户已注销

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        中间停留后蛋白在凝胶中是会弥散的,通常都是完成电泳后就尽快转膜,否则弥散后,有些实验结果就无法判断了。如果时间确实不合适,建议:1.改变电泳的时间,例如把做好的凝胶在4C,泡缓冲液中保存(当然,这个时间也不建议太长,过夜什么的还行,要是几天就不太好了),等到时间充分的时候再电泳。2.或者如果时间差的不太多,可以把电泳的电压稍微调低点,跑慢点,处理完其他事情再来转膜。总体来说,电泳后尽快转膜。

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        bamboopiggy

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        你最好把电压调小,然后回来转膜,别把胶放时间太长,会弥散。转膜完成,只要泡在Western转膜液中不拿出来,问题不大

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        汤姆卜丽波

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        原理上其实没关系,因为你的膜一直在活化中,应该没关系

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        balalaLy

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        有没有留意一下marker有没有弥散,如果没有的话就还好。建议以后不要在电泳液中放置太久。宁愿电泳跑慢一点

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        huarenqiang5

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        应该影响不是很大,但是也不是绝对的。

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        申东熙老伯

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        转膜只要不把膜拿出来就没有问题,电泳的话建议不要停太久,蛋白会弥散。

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