蛋白免疫印迹，条带很细是怎么回事？
萧萧暮雨子规啼
最近在做WB，培养的细胞，进行裂解处理。但是有个蛋白跑出来，条带很细，感觉都没法用来定量了,从5增加到了10,还是这样，请问一下各位，这大概是什么原因造成的？
5 个回答
huarenqiang5
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考虑是否是胶或抗体的浓度问题？
申东熙老伯
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一方面可能是上样量少，蛋白浓度低，也可能是转膜转太久，转过了。
土井挞克树
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可能是你上样量的问题，加大上样量试一下。
balalaLy
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条带很细也一样可以做灰度分析的呀。细可能是因为一方面蛋白量比较低，同时loadingbuffer 中含的巯基乙醇比较高，巯基乙醇可以打断蛋白分子亚基间的二硫键，使蛋白压缩，跑出来的条带就会很细
NatureBios
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定量通常是用目的蛋白印记和内参的比值，如果印记细或弱，那就增加上样量，提高一二抗的浓度和更换更灵敏的显影液
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