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科研学霸天团,48小时有问必答
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自噬蛋白LC3的正确写法?
dxyc42u
这三个区别是LC3A、LC3B和LC3C是LC3的三种亚型,LC3-I和C3-II是LC3在细胞不同部位剪切而来。这几种都是正确写法,具体看你研究的方向。
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WB按照常规操作,最后显影出现白板是为啥?
dxyc42u
不排除是发光液的问题,换个发光液试试
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问
如何验证蛋白和糖结合
土井挞克树
可以检测蛋白与葡聚糖的连接键也就是糖肽键来检测蛋白和葡聚糖的结合。方法有几种,但是对蛋白的需求量不同。1、亲和色谱法:蛋白溶液跑亲和层析柱子,buffer洗,收集结合特异性强的部分,进行检测。2、电泳检测:将蛋白、蛋白和多糖的共孵育液跑电泳,比较条带的位置。3、HPLC Size Exclusion:蛋白和多糖的共孵育液跑HPLC Size Exclusion。4、如果蛋白量少,可以用生物大分子相
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问
蛋白诱导条件摸索优化
dxy_9f7mnbp2
我遇到了相类似的问题,我是16度诱导20小时,诱导不出来,设置了3个IPTG浓度梯度,分别为0.2 0.8 0.5mM,请问一下你的诱导出来了吗?
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问
请问合成的金纳米ph是7左右,可以通过加碳酸钾溶液调ph,可是ph值只能往大调,怎么往小调呢
loveliufudan
如果你想将合成的金纳米颗粒悬浮液的pH值从中性(约7)调低,即向酸性方向调节,可以采取以下方法: 1. 酸性溶液添加:可以添加强酸性溶液,如盐酸(HCl),硝酸(HNO3),或者有机酸如乙酸(CH3COOH)。逐渐滴加所需量的酸性溶液到金纳米颗粒悬浮液中,并搅拌均匀,以达到所需的酸性pH值。 2. 酸性缓冲液:使用含有酸性缓冲剂的溶液,如乙酸/乙酸钠缓冲液或磷酸盐缓冲液。将适量的酸性缓冲液加入金纳
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问
实验室有工作浓度的胰酶,但不知道胰酶10ug/ml怎么算,1ml中要加多少ul
huarenqiang5
如果是10ug/ml,那么1ml中就需要加10ul。
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问
预测靶蛋白的互作蛋白有哪些方法呢?除了打质谱
sswei
Co-IP,GST-Pull down和酵母双杂交是研究蛋白互做最常用的三种方法,一般常用酵母双杂交来筛选,用Co-IP和GST pull down用来验证。
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请教哪个杂志投稿时不需要提交western blot 3张原图的?
huarenqiang5
sci都必须要提交原图,建议你投其他杂志。
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wb转膜之后老是很斑驳
dxyc42u
应该温度高了,有冷库的话放在里面跑
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WB条带问题
dxyc42u
应该是转膜出了问题,没有转上。
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问
WB突然目的蛋白不显带了
dxyc42u
应该是抗体的问题,换个抗体跑一次看看
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WB实验,新手小白第一次做,60KD蛋白最后显影没有条带,想问一下湿转转膜条件
balalaLy
60kDa的蛋白Western转膜液不需要添加SDS,SDS是促进蛋白从胶里面脱离出来,大分子蛋白可以尝试添加。转膜时间有点短了。可以观察一下胶上面还有没有残留的marker。如果有就是没有完全转过去。
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蛋白银染
dxyc42u
可能是银染步骤上和试剂的问题;因为银染里有好多步,要洗,要冲的;有些不能洗的太厉害,有些又不能染的太短,这些其实个人认为都是试剂里分子与胶相互作用的关系,分子运动与温度有很大关系,所以可能你夏天就出来了,冬天就出不来。
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nc组条带相比过表达组很浅几乎没有怎么解决
清道夫夫夫
请问楼主,后来找到解决方法了吗?我也出现了给你一模一样的情况
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金属材料表面蛋白吸附实验测定
dxyc42u
我们一般使用BCA法进行测定,跟做wb时候差不多
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刀豆蛋白刺激t细胞
sswei
刀豆球蛋白 A 是一种植物血凝素,具有强力的促有丝分裂作用,有较好的促淋巴细胞转化反应的作用,也能选择性激活抑制性 T 细胞。不同浓度的刀豆球蛋白A对人外周血T淋巴细胞的刺激效果不同,以20 μg/mL时刺激增殖效果最好。大于20 μg/mL时,刀豆球蛋白A表现出对人外周血T淋巴细胞的抑制作用。
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问
Lewis肺癌细胞表达CCR5吗?
dxyc42u
Lewis肺癌细胞表达CCR5,但是表达很低
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重组蛋白和抗体的区别
loveliufudan
重组蛋白和抗体都可以作用于细胞,但它们的作用机制和途径略有不同。重组蛋白(例如细胞因子、生长因子等)可以通过与细胞表面的受体结合,触发细胞内信号传导途径,从而影响细胞的功能和行为。这些重组蛋白通常以溶液形式添加到细胞培养基中,与细胞表面受体发生特异性的相互作用,导致细胞内信号转导的激活,从而影响细胞的增殖、分化、存活等生物学过程。抗体则可以通过其结构中的抗原结合部位与特定的抗原结合。当抗体与其特异
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求教ATDC5诱导的protocol,以及ATDC5转染相关的问题
loveliufudan
在终止诱导后,一般情况下是不需要继续添加诱导剂来维持稳定的表型。诱导剂的作用是通过激活或抑制特定的信号通路或基因表达来引导细胞向特定的分化状态转变。一旦终止诱导,不再添加诱导剂的话,细胞会逐渐恢复其基础状态。关于ATDC5细胞的问题,ATDC5细胞是一种常用的诱导成软骨细胞的细胞系。一般情况下,可以通过给予适当的诱导剂(如Insulin、Dexamethasone和Ascorbic acid等)来
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求助:WB蛋白提取
huarenqiang5
这个不影响测浓度,对实验结果没什么影响。
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