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问
细胞能被病毒感染,但为何GFP荧光很弱?
dxyc42u
可能是感染时病毒加入量有点少的原因
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问
对照病毒或目的病毒感染细胞以后,细胞形态发生改变或者细胞死亡?
dxyc42u
这种情况很可能是病毒加入太多了,建议减少病毒加入量
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问
感染悬浮细胞或半悬浮细胞时,没有平角离心机怎么办?
王堇文
准备干净的10ml 15ml离心管,转移进离心管进行离心就好
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问
什么是MOI?
dxy_8u2vpm02
jjjhgyfddddddddddd
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问
病毒使用过程中如何进行稀释?
sswei
需要稀释病毒时,将病毒从-80℃冰箱中取出,置于冰上溶解,然后用PBS或培养基(不含血清)稀释到所需浓度后轻柔混匀,尽快使用。
3 回答
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问
收到病毒后如何保存?
dxyc42u
收到病毒负八十保存,避免反复冻融,溶解后四度保存,可以用一周
3 回答
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问
如何确定向细胞中加入病毒的最佳时间?
dxyc42u
生长旺盛的细胞提前一天铺板后就可以接种了
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问
用于病毒感染的细胞接种量是多少?
dxyc42u
这个可以做预实验摸索,每种细胞都不一样,我养的细胞24孔板接种0.5x10五次方
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问
慢病毒载体和腺病毒载体,该怎么选?
sswei
慢病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,携带外源基因的慢病毒载体在包装质粒、细胞系的辅助下,包装成有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。利用慢病毒载体,可研究启动子调控、过表达特定基因或沉默特定基因(RNAi)等。腺病毒载体(Adenoviral Vector)是以目前常用的人类腺病毒5型(基因组是一个线性的36kb dsDNA分子)为基础发展起来
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问
SDS-PAGE蛋白电泳实验,设置同样的电压,但是不同时间做,电流相差很大,有时不出带,为什么会出现这种情况?如何消除?
FrEShAIFE
可能和你电泳液的新旧程度有关。内槽放新配置电泳液,外槽放旧液。而且不出条带的话,也有可能是转膜的问题,转膜的时候也要关注电流电压的大小。
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问
进行ITPG诱导实验时,为什么需要做对照实验?
土井挞克树
对照的目的是为了说明ITPG的诱导作用,排除体系中其他诱导因素
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问
截短质粒做co-ip有没有可能出现所有截短都能够拉到目的分子,如果出现了可能的原因是什么。
dxy_mqg1dtg8
这可能是由于以下原因:1. 共价交联:共价交联是指两个或多个蛋白质之间形成的共价键。如果截短质粒上的区域包括两个或多个蛋白质之间的交联位点,则所有截短都可能与目的分子相互作用。2. 不完全截短:如果截短质粒没有完全截短,也可能导致所有截短都能够拉到目的分子。这可能是由于截短质粒的设计存在问题,例如设计的引物不准确或控制序列没有完全删除。3. 结构域与目的分子的接口:如果截短质粒上的结构域与目的分子
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问
慢病毒感染THP1细胞,感染效率鉴定不出来了怎么办
dxyc42u
有可能是嘌呤霉素浓度高了之后病毒感染过的细胞杀死了,毕竟感染过的细胞没有未感染的细胞耐受
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问
自噬蛋白LC3的正确写法?
dxyc42u
这三个区别是LC3A、LC3B和LC3C是LC3的三种亚型,LC3-I和C3-II是LC3在细胞不同部位剪切而来。这几种都是正确写法,具体看你研究的方向。
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问
WB按照常规操作,最后显影出现白板是为啥?
dxyc42u
不排除是发光液的问题,换个发光液试试
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问
如何验证蛋白和糖结合
土井挞克树
可以检测蛋白与葡聚糖的连接键也就是糖肽键来检测蛋白和葡聚糖的结合。方法有几种,但是对蛋白的需求量不同。1、亲和色谱法:蛋白溶液跑亲和层析柱子,buffer洗,收集结合特异性强的部分,进行检测。2、电泳检测:将蛋白、蛋白和多糖的共孵育液跑电泳,比较条带的位置。3、HPLC Size Exclusion:蛋白和多糖的共孵育液跑HPLC Size Exclusion。4、如果蛋白量少,可以用生物大分子相
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问
蛋白诱导条件摸索优化
dxy_9f7mnbp2
我遇到了相类似的问题,我是16度诱导20小时,诱导不出来,设置了3个IPTG浓度梯度,分别为0.2 0.8 0.5mM,请问一下你的诱导出来了吗?
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问
请问合成的金纳米ph是7左右,可以通过加碳酸钾溶液调ph,可是ph值只能往大调,怎么往小调呢
loveliufudan
如果你想将合成的金纳米颗粒悬浮液的pH值从中性(约7)调低,即向酸性方向调节,可以采取以下方法: 1. 酸性溶液添加:可以添加强酸性溶液,如盐酸(HCl),硝酸(HNO3),或者有机酸如乙酸(CH3COOH)。逐渐滴加所需量的酸性溶液到金纳米颗粒悬浮液中,并搅拌均匀,以达到所需的酸性pH值。 2. 酸性缓冲液:使用含有酸性缓冲剂的溶液,如乙酸/乙酸钠缓冲液或磷酸盐缓冲液。将适量的酸性缓冲液加入金纳
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问
实验室有工作浓度的胰酶,但不知道胰酶10ug/ml怎么算,1ml中要加多少ul
huarenqiang5
如果是10ug/ml,那么1ml中就需要加10ul。
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问
预测靶蛋白的互作蛋白有哪些方法呢?除了打质谱
sswei
Co-IP,GST-Pull down和酵母双杂交是研究蛋白互做最常用的三种方法,一般常用酵母双杂交来筛选,用Co-IP和GST pull down用来验证。
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