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        慢病毒载体和腺病毒载体,该怎么选?

        相关实验:慢病毒包装实验

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        93zlah8

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        慢病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,携带外源基因的慢病毒载体在包装质粒、细胞系的辅助下,包装成有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。利用慢病毒载体,可研究启动子调控、过表达特定基因或沉默特定基因(RNAi)等。

        腺病毒载体(Adenoviral Vector)是以目前常用的人类腺病毒5型(基因组是一个线性的36kb dsDNA分子)为基础发展起来的基因治疗载体,其对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力,可通过受体介导的内吞作用进入细胞内,将AV基因组转移至细胞核内,但又保持在染色体外,不整合进入宿主细胞基因组中。腺病毒载体大多是E1和E3基因缺失的,感染细胞后不会在细胞体内进行复制(转有E1基因的HEK293细胞等除外),是较为安全的基因治疗载体。但该病毒仍然具有可能的潜在的生物学危险,建议不要使用编码已知或可能会致癌的基因的假型病毒,除非已经完全公认某个基因肯定没有致癌性,否则均不建议采用假型病毒进行生物学实验。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        慢病毒载体转染效率高,可以构建稳定表达细胞系.但是,有可能发生重组的危险,所以要小心.

        腺病毒载体做瞬时表达,转染较容易.但是,转染效率不高.

        user-title

        93zlah8

        有帮助

        不管是慢病毒载体还是腺病毒载体,都是很好的基因调控工具,各自有自己的优势,主要根据实验目的不同来选择,可以参考以下几个方面来判断:
        (1) 插入目的序列的大小:慢病毒载体包装容量在2kb以内可以保证滴度,腺病毒包装容量在5kb以内可以保证滴度;若目的序列大小超过载体容量,滴度则会随着目的序列大小增加而降低;
        (2) 是否需要构建稳转细胞株:慢病毒载体可以将外源基因随机整合到目的细胞基因组中并稳定遗传,即可用于构建稳转细胞株,当然做瞬时转染也可以;而腺病毒不整合基因组,只适用于瞬时转染;
        (3) 目的细胞类型:像神经细胞、一些原代细胞等感染难度比较大的细胞,且后续无需建立稳转株,推荐使用腺病毒,其感染效率要远高于慢病毒。

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