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科研学霸天团，48小时有问必答

问有没有大佬解答一下为什么沉默组的目的基因表达会比对照组更高啊 pcr跑出来呈现的是对照组低于沉默组沉默组低于空载组

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问wb蛋白鉴别实验凝胶脱色后 marker泳道相比于样品泳道背景更透明

百泰派克-李工

在Western Blot (WB) 蛋白鉴别实验中，凝胶脱色后发现marker泳道相比于样品泳道背景更透明，是实验过程中常见的现象，通常是由几个因素造成的：1.蛋白质浓度差异：样品中的蛋白质浓度可能远高于marker。在染色和脱色过程中，高浓度的蛋白质可能导致更强的染色，相应地，在脱色时也更难以完全去除染料。2.蛋白质组成差异：样品中的蛋白质可能与染料有更强的亲和力，或者样品中含有某些染料难以去

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问BSA和BSA fraction有什么区别啊？怎么选择呢？

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问蛋白纯化时，老是挂不上柱子是为什么呢？

百泰派克-李工

在蛋白纯化过程中，如果蛋白质不能有效地吸附到柱子上，可能有几个原因：1.缓冲液pH不适宜：蛋白质的结合通常取决于其等电点和缓冲液的pH。如果pH不适宜，蛋白质可能无法正确结合。2.盐浓度过高或过低：盐浓度会影响蛋白质的溶解度和结合能力。如果盐浓度不适宜，可能会阻碍蛋白质的吸附。3.柱子的问题：柱子可能被堵塞或者失活。需要检查柱子是否正确存储和维护。4.蛋白质的特性：有些蛋白质可能因为其特殊的物理或

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问蛋白表达的时候一段加his和两段都加有什么区别吗？会对影响吗？

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问蛋白用pmal载体表达不出来，表达出来的是一条比自己的目的条带大20左右的带，自己的条带应该在65左右

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问各位大佬，想问问这个条带跑成这样可能是什么原因呀，跑了好几次都有这样的情况。

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问重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？

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问Coip实验IgG总是有条带

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问ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠造模2月到3月，小鼠体重会增长吗？

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问WB肠组织蛋白提取上清黄色正常吗？

百泰派克-李工

在Western Blot（WB）实验中，肠组织蛋白提取的上清呈现黄色是正常的情况。这种黄色通常来源于组织中的胆汁色素，这些色素可以使蛋白提取液呈现黄色。然而，需要注意的是，样品的颜色并不直接影响Western Blot实验的结果，更重要的是确保蛋白提取和浓度测定的正确性。如果有其他异常现象或者实验结果不理想，可以考虑检查提取步骤和使用的试剂。

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问蛋白上样缓冲液HU buffer室温放置几小时会有影响吗

百泰派克-李工

蛋白上样缓冲液（HU buffer）放置在室温下几小时通常不会对其性能产生重大影响。这种缓冲液通常包含有助于维持蛋白质稳定性的成分，如还原剂和防止蛋白降解的物质。然而，长时间的室温暴露可能会降低其效率，尤其是如果缓冲液中包含敏感的还原剂，如DTT或β-巯基乙醇。为了保证最佳效果，最好按照制造商的建议储存和处理缓冲液，并在使用前进行适当的预热。

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问兔多抗用溴化氢琼脂糖凝胶纯化没有成功是什么原因？一般怎么验证抗原偶联上了？

百泰派克-李工

使用溴化氢琼脂糖凝胶纯化兔多抗失败可能有多方面的原因，比如：1.凝胶本身的问题：凝胶的特性可能不适合所用的抗原或抗体，不同的凝胶有不同的孔隙大小和亲和力特性，确保使用的琼脂糖凝胶适合于你的实验。2.偶联效率低合：如果抗原和载体（如琼脂糖珠）的偶联效率不高，可能导致目标抗体的亲和力不足。3.洗脱条件：洗脱条件（如pH、盐浓度）可能不适宜，导致抗体不能有效从凝胶中洗脱出来。调整洗脱液的pH值或盐浓度可

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问维生素D3真的可以诱导骨髓间充质干细胞向破骨细胞分化么？

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问跑胶marker条带背景变透明

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问目的蛋白分离正常，但内存actin连在一起，这要怎么办？

dxy_0wr8rcjw

我想请问下你这目的蛋白为啥能分离开啊我的都是连的很紧密

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问求助！为什么actin跑出来总是连在一起是为什么？

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问Wb小白求助各位大佬肠occludin

dxy_18063lu9

请问你跑出来了吗？？用什么参数？条带怎么样？

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问同一个实验，但是不同的人做出来结果差异大的原因是什么？

露路1234

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问肿瘤成瘤后注射慢病毒后检测的时间

feixue7758527w

一般就是一周后进行检测，如果没有就要隔周进行一次检测，然后精确时间的

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