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问
重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽,直接跑 2D 的一向吗?
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问
Coip实验IgG总是有条带
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问
ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠造模2月到3月,小鼠体重会增长吗?
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问
WB肠组织蛋白提取上清黄色正常吗?
百泰派克-李工
在Western Blot(WB)实验中,肠组织蛋白提取的上清呈现黄色是正常的情况。这种黄色通常来源于组织中的胆汁色素,这些色素可以使蛋白提取液呈现黄色。然而,需要注意的是,样品的颜色并不直接影响Western Blot实验的结果,更重要的是确保蛋白提取和浓度测定的正确性。如果有其他异常现象或者实验结果不理想,可以考虑检查提取步骤和使用的试剂。
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问
蛋白上样缓冲液HU buffer室温放置几小时会有影响吗
百泰派克-李工
蛋白上样缓冲液(HU buffer)放置在室温下几小时通常不会对其性能产生重大影响。这种缓冲液通常包含有助于维持蛋白质稳定性的成分,如还原剂和防止蛋白降解的物质。然而,长时间的室温暴露可能会降低其效率,尤其是如果缓冲液中包含敏感的还原剂,如DTT或β-巯基乙醇。为了保证最佳效果,最好按照制造商的建议储存和处理缓冲液,并在使用前进行适当的预热。
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问
兔多抗用溴化氢琼脂糖凝胶纯化没有成功是什么原因?一般怎么验证抗原偶联上了?
百泰派克-李工
使用溴化氢琼脂糖凝胶纯化兔多抗失败可能有多方面的原因,比如:1.凝胶本身的问题:凝胶的特性可能不适合所用的抗原或抗体,不同的凝胶有不同的孔隙大小和亲和力特性,确保使用的琼脂糖凝胶适合于你的实验。2.偶联效率低合:如果抗原和载体(如琼脂糖珠)的偶联效率不高,可能导致目标抗体的亲和力不足。3.洗脱条件:洗脱条件(如pH、盐浓度)可能不适宜,导致抗体不能有效从凝胶中洗脱出来。调整洗脱液的pH值或盐浓度可
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问
维生素D3真的可以诱导骨髓间充质干细胞向破骨细胞分化么?
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问
跑胶marker条带背景变透明
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问
目的蛋白分离正常,但内存actin连在一起,这要怎么办?
dxy_0wr8rcjw
我想请问下你这目的蛋白为啥能分离开啊 我的都是连的很紧密
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问
求助!为什么actin跑出来总是连在一起是为什么?
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问
Wb小白求助各位大佬 肠occludin
dxy_18063lu9
请问你跑出来了吗??用什么参数?条带怎么样?
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问
同一个实验,但是不同的人做出来结果差异大的原因是什么?
露路1234
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问
肿瘤成瘤后注射慢病毒后检测的时间
feixue7758527w
一般就是一周后进行检测,如果没有就要隔周进行一次检测,然后精确时间的
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问
同样的制胶条件和环境,一块胶上样丝滑无阻碍,一块总觉得上样孔里有残胶
feixue7758527w
这个可能是梳子不行的,你可以拔掉梳子后用枪吹打一下加样孔试试
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问
原核表达重组质粒测序正确,构建成功,但是双酶切验证跑不出条带 这是为啥
周末也要努力呀
有可能,也可以从下面原因考虑:1. 酶切条件不正确:双酶切验证需要使用适当的酶切缓冲液和温度来进行酶切反应。如果酶切条件不正确,可能导致酶切不完全或者根本没有酶切产物。建议检查酶切反应条件是否正确,并根据酶切酶的推荐条件进行优化。2. 酶切位点有变异:双酶切验证需要确保目标序列中存在预期的酶切位点。如果目标序列中的酶切位点发生了变异,可能导致酶切不完全或者根本没有酶切产物。建议重新检查目标序列的酶
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问
转录组学差异基因没有鉴定出名字是为什么
土井挞克树
没有名字可能是鉴定错误,重新鉴定出对应的id后再设计引物
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905 围观
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问
请问,WB电泳的时候,蛋白的上样量为什么是20ug-30ug,蛋白量过多过少会怎么样?蛋白上样量是与WB的测定目的有关吗?
百泰派克-李工
Western Blot(WB)实验中,蛋白的上样量通常建议在20μg-30μg之间,因为这个量级通常能保证足够的蛋白量以获得清晰的条带,同时又不至于过多导致信号饱和或条带模糊。如果蛋白量过多,可能导致信号过强、条带模糊,甚至可能出现条带堆积的现象;如果蛋白量过少,则可能导致信号弱,难以检测到目标蛋白。此外,蛋白上样量也与WB的具体测定目的有关。例如,当研究低丰度蛋白或进行定量分析时,可能需要调整
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问
western blot 分离胶对应的浓度与蛋白大小(KD)的关系是怎么样的呢
周末也要努力呀
胶浓度越大跑的分子量越小,反之跑大分子得用浓度小的胶
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问
求助SDS-page实验部分条带未显示
高山云初
可能是由于样品中蛋白质浓度太低或者电泳条件不合适导致的。
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问
跑蛋白的时候总是出现这种情况,一个孔的样品会漏到下面去,这怎么办?
高山云初
如果是上样过程容易漂出孔道,需考虑两点: 孔道容量到底是多少,加样必须在什么范围内。如果加样量小于孔道容量,不应该有问题 你的上样缓冲液是否足够重和粘稠
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