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        蛋白纯化时,老是挂不上柱子是为什么呢?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        谢谢谢谢哈哈哈哈


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        1 个回答

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        百泰派克-李工

        有帮助

        在蛋白纯化过程中,如果蛋白质不能有效地吸附到柱子上,可能有几个原因:

        1.缓冲液pH不适宜:

        蛋白质的结合通常取决于其等电点和缓冲液的pH。如果pH不适宜,蛋白质可能无法正确结合。

        2.盐浓度过高或过低:

        盐浓度会影响蛋白质的溶解度和结合能力。如果盐浓度不适宜,可能会阻碍蛋白质的吸附。

        3.柱子的问题:

        柱子可能被堵塞或者失活。需要检查柱子是否正确存储和维护。

        4.蛋白质的特性:

        有些蛋白质可能因为其特殊的物理或化学特性而难以吸附。例如,非常疏水的蛋白质或者容易形成沉淀的蛋白质。

        5.样品处理不当:

        样品可能因为处理不当(如冻融循环过多、过度机械处理等)而导致蛋白质变性。

        针对这些问题,可以调整缓冲液pH和盐浓度、检查和维护柱子、考虑使用更适合特定蛋白质的纯化方法,以及优化样品处理步骤。


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