同样的制胶条件和环境，一块胶上样丝滑无阻碍，一块总觉得上样孔里有残胶

这个可能是梳子不行的，你可以拔掉梳子后用枪吹打一下加样孔试试

考虑是梳子的问题，建议排查下。

已经把TEMED减量延长浓缩胶凝固时间了还出现这样的情况，那可能是促凝剂的问题，可能是促凝剂效率降低了，你可以尝试将促凝剂更换试一下，可能就没问题了。多次融化再冷冻会降低促凝剂的效果。

在进行凝胶电泳实验时，如果在一块胶上样丝滑无阻碍，而另一块胶上样品进不去或无法完全进入孔中，可能存在以下几个可能的原因和解决方法：

孔口堵塞或胶孔不完整：检查胶板的孔口是否清洁，确保没有残留的胶体或杂质。可以使用细长的吸管或针头小心地清理孔口。另外，确保胶孔完整，没有受损或堵塞。

胶溶液凝固时间不足：尽管你已经加长了浓缩胶的凝固时间，但仍有一块胶出现问题。可以进一步增加胶溶液凝固的时间，确保完全凝胶化。请参考胶的制备方法和说明书，调整凝胶化时间。

胶溶液配制问题：检查胶溶液的配制是否准确。确保按照指定比例和步骤配制胶溶液，并充分混合。如果使用了老化的胶溶液或胶溶液成分有问题，可能会导致胶的质地不均匀或凝胶化不完全。

胶板质量问题：不同批次或不同品牌的胶板质量可能存在差异。如果一块胶总是有问题，而另一块胶没有，可以尝试更换胶板，看是否能够解决问题。

上样技术问题：确保在上样时使用正确的方法和工具。使用微量移液器或准确的吸管进行上样，确保样品能够顺利进入胶孔中。避免气泡的产生，以免阻碍样品进入孔中。

可能是促凝剂效率降低了，你可以尝试将促凝剂更换试一下，应该就没问题了。

建议后续做实验，先将促凝剂分装，每次拿出一部分。

那可能是另外一块胶塑形有问题，上胶孔道不够光滑所以有残留

在上样时上清没有被吸取到，沉淀物被吸取一部分

自制胶目前我碰到最大的问题是上样孔残胶，这是由于梳子和玻璃板之间存在空隙，导致两者之间形成一层薄薄的胶导致的。上样的时候一旦枪头戳到了这层胶，就会导致样本下不去，甚至溢出上样孔。查阅了很多中英文资料，尝试过新梳子、洗干净玻璃、改良试剂等方法，均不能解决这个问题。目前我用两个手段解决残胶问题。其一是使用专用的上样枪头，不同于10ul枪头，这种枪头能直接插到上样孔底部，管它有没有残胶都能上样，而且也可以用这个枪头搅一下上样孔，把残胶给捅开。其二是插好梳子之后，在梳子两侧夹两个燕尾夹加压，使得玻璃板和梳子紧密贴合，夹好之后即可看见有少许浓缩胶溢出（这个方法的不良后果是松开夹子后，胶和玻璃板之间可能存在空隙从而导致漏样）。

可能是梳子与玻璃板不匹配，上样前用200ul或1ml枪吹一下每个孔，将残胶吹走

加样的时候用针头挑一下，或者液体冲一下就行

可能是上样时没有完全吸到上清，吸入了一部分沉淀。建议增加样品的体积，让上清足够多，样品上样前增大离心时间，确保沉淀被离下去。其次，上样的时候枪头不要一直伸到最底，建议在离沉淀远的位置轻轻取样进行上样。