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科研学霸天团，48小时有问必答

问关于RNase R和放线菌素D有没有必要做？

loveliufudan

在验证cirRNA的时候,RNase R处理与聚乙烯醇沉淀确实是常用的方法,但进行这两项实验可能需要一定的成本,以下是一些建议:1. 如果仅为了验证cirRNA的环型结构,设计环内和环外引物进行PCR验证也是可以的。确保引物跨断环结点。2. 可以只做RNase R处理实验,因为其可以降解线性RNA而不影响环型RNA,可以验证cirRNA的环形性质。3. 不一定需要聚乙烯醇沉淀实验,该实验主要是提供

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问提rna急急急求助。救命

Luckybabygirl

有没有可能是细胞量实在是太少，再加上乙醇浓度不够，所以才这样，试试提高细胞量，用10cm的培养皿看看

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问RNA的260/280大于2.2，但是跑胶三条带明显，这是降解了还是没降解啊

huarenqiang5

你这个从图片上来看是已经降解了。

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问RNA定量酶标仪显示高参考波长检测是什么意思。

huarenqiang5

是指超过酶标仪特定的长度进行的检测。

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问RNA干扰技术的基本原理有哪些？

loveliufudan

RNA干扰(RNAi)技术的基本原理主要包括以下几点:1. 引入双链RNA(dsRNA):外源性引入大小约20-25nt的小分子dsRNA。2. Dicer酶切成siRNA:细胞内Dicer酶会识别并切割长的dsRNA,生成小的siRNA。3. siRNA与mRNA互补结合:siRNA作为RNA诱导沉默复合体(RISC)的一部分,与目标mRNA的互补序列特异性结合。4. mRNA降解:结合后的mR

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问英语基础差，写作英文文文章困难，怎样快速提升

sswei

快速提升英语写作能力方法1首先，想要快速提升英语写作能力必须要多读英语作品，包括散文、小品文、小说、时事新闻等等一切可以运来阅读的英语作品都可以拿来读，只有读的越多才能更快地提升自己的英语写作能力。2其次，快速提升自己的英语写作能力要学会借鉴，因为通过阅读别人的英文作品一定会遇到好的语句和写作的套路，而这些都可以通过借鉴为我所用，因此只有学会借鉴别人的优点才能快速提升自己的英语写作能力。3再次，将

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问外周血提取RNA

loveliufudan

关于从全血中提取RNA的方法,建议如下:1. 血浆和白细胞分离后最好装在无RNase的EP管中,因为常规管可能含有RNase,降解RNA。 2. 如果没有无RNase管,把管子高压消毒也可以灭活RNase,但效果可能不如无RNase管保险。3. 白细胞收集后直接用TRI Reagent或者Trizol裂解更好,不需要冻存。因为冻存过程中细胞破裂,RNase易降解RNA。4. 如果白细胞需要冻存,建

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问SUMO化IP该用什么裂解液

飞跃迷雾1

如果互作特别强的话用RIPA是可以的，但是如果不确定互作的强弱或者说互作没那么强，用IP专用裂解液会好一些。也可以自己配的，因为有不同的ph，要做预实验来摸索一下你的细胞系和蛋白的最适裂解PH。当然也可以买商品化的IP裂解液

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问请教用加尾法进行microrna的反转录和qpcr

从头酷到矫

你好.可以分享一下u6的引物序列嘛

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问请问，想用RNAi达到提高死亡率的效果，在干扰片段设计的时候，片段包含保守结构域，干扰效果会增强嘛？

loveliufudan

RNA干扰（RNAi）是一种通过抑制特定基因表达来实现功能研究或治疗的方法。干扰片段的设计对于RNAi的效果至关重要。包含保守结构域的干扰片段可能会增强RNAi的效果。保守结构域指的是在物种间高度保守的RNA序列或结构区域，其功能通常与基因的正常功能密切相关。通过干扰保守结构域，可以选择性地干扰目标基因，从而增强RNAi的效果。不过，干扰片段的设计还涉及其他因素，如选择适当的目标序列和优化片段的化

3 回答446 围观

问这提取的rna还能用吗，最下面条带是啥呀，为啥那么亮?第二张图为什么marker条带越大越不亮?

dxy_mqg1dtg8

RNA从上到下三条带应该为28S，18S，5S，5S这么亮很可能是RNA降解了。

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问如果是rna病毒，一步法可以扩出片段，用反转录成cdna，再用高保真酶扩不出来片段了，这是为啥，怎么可以看cdna有没有转成功呢

huarenqiang5

考虑可能是你的高保真酶存在问题。

4 回答584 围观

问前体mRNA (pre mRNA)的引物设计问题

晓雨知春来

在设计CHK1前体mRNA的qPCR引物时，你可以使用NCBI提供的基因序列信息，包括外显子和内含子的边界，以及前体mRNA序列。利用引物设计工具，根据上述原则选择合适的引物序列。

3 回答5669 围观

问顺铂细胞实验工作液配置

dxyc42u

可以一次性溶解配成储存液，可以用无菌水溶解，储存液分装了放在负20保存，需要避光保存

3 回答4690 围观

问miRNA的问题

土井挞克树

是同一mirna的不同亚型，分子结构上存在差异

3 回答462 围观

问手提大肠杆菌RNA时，跑出来的RNA条带下面总是有一条特别亮的条带，有人知道是什么吗？

huarenqiang5

可能是RNA发生了严重的降解。建议重新提取。

3 回答1625 围观

问RNA提取

是TTT

只有一条单一且亮的条带，其他地方条带模糊，但是也能看出大概位置，所以考虑样品降解了提新样品之前建议重新跑一次琼脂糖凝胶，排除一下跑胶的问题

4 回答620 围观

问siRNA转染

申东熙老伯

中间一整块都没有细胞可能是换液是枪头吸了培养基直接打在上面了，可以从六孔板的壁上加培养基以及转染复合物，加了之后摇匀就可以了。

3 回答751 围观

问请问这个RNA跑电泳后呈现钩状咋回事啊

dxyc42u

应该是那个位置的胶出现了问题。

3 回答294 围观

问求助碧云天RNA nase使用小技巧

dxyc42u

很有可能是rna提的不够纯导致的

3 回答464 围观

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