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        请问一下做单B细胞技术的大佬,我做巢式pcr看文献是p出抗体可变区,恒定区去掉,为什么不能连恒定区一起p呢?求解答🙏🙏

        相关实验:巢式 PCR

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        dxy_54fklm8q


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        3 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        恒定区不需要做pcr,后续直接结合抗体就可以

        user-title

        周末也要努力呀

        有帮助

        因为抗体可变区是抗体分子中变异最大的区域,而恒定区则是相对保守的区域。由于可变区的序列多样性较高,恒定区的序列相对保守,因此在PCR反应中,可变区和恒定区的扩增条件可能会有所不同。

        通常情况下,巢式PCR可以分为两个步骤进行。首先,进行第一轮PCR反应,使用一个通用的引物对抗体可变区进行扩增。然后,将第一轮PCR产物作为模板,使用特异性引物对可变区和恒定区进行第二轮PCR反应。

        因此,虽然可变区和恒定区的扩增条件可能不同,但可以通过巢式PCR的两个步骤一起扩增出来。你问的这种是可以的。

        user-title

        dxy_54fklm8quser-title

        好的谢谢,为什么以第一轮可变区为模板,可以p出可变区和恒定区呀,有点不太理解,求解答谢谢🙏

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        高山云初

        有帮助

        没有意义,可变区形成许多种具有不同结合抗原特异性的抗体,恒定区是制备第二抗体,应用荧光、酶、同位毒等标记抗体的重要基础。

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