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        求助,荧光定量无CT值

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

        user-title

        顺利毕业的陈陈

        扩增曲线 熔解曲线如图,Tm值也有,跑完的时候电脑显示荧光信号过强,请降低荧光阈值,actin也没有CT值,p了40个循环,请问有人知道这是为什么吗。图片描述图片描述

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        3 个回答

        user-title

        juyue2010

        有帮助

        可能是没有设置,在每一个循环收集一次荧光信号

        user-title

        顺利毕业的陈陈user-title

        非常感谢您的回答,现在我又出现了一次这种情况,但是CT值都很正常,不知道为什么。我们这个都是设置好的程序,我们跑的时候直接重新设置温度就好,而且我同一天跑的其他都没有出现这种情况。

        user-title

        Dr_劉医生

        有帮助

        跑了40个循环,先检查一下引物探针的特异性,是否合适;然后大概率就是模板量降解了,或者上样量不足

        user-title

        顺利毕业的陈陈user-title

        非常感谢您的回答,引物我都是先做了RTpcr确定是单一条带后跑的荧光。上样量的问题我也想过,但是它显示荧光信号过强,是因为模板浓度低嘛,为什么低还会过强,不是应该高才会过强吗?还想问您一下,我今天又出现了这个情况,但是CT值是正常的,这个CT值还可以用吗?为什么这次的CT值是正常的?

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可能是由于系统界面参数设置错误所导致的

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