没有CT值出现，可能原因有哪些？

反应循环数不够

一般都要在35个循环以上，可根据实验情况增加循环（如至45循环）， 但高于45个循环会增加过多的背景信号

检测荧光信号的步骤有误

一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号

引物或探针降解

可通过PAGE电泳检测其完整性

模板量不足

对未知浓度的样品应从系列稀释样本的zui高浓度做起

模板降解

避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况发生

目的基因在组织中不表达或者表达量低

尝试其它组织

mix配错了，里面少加了引物，样品没有加到孔里，机器坏了，目的基因的丰度太低

如果在荧光定量PCR检测报告页面出现了ROX的荧光值 为0的情况，很可能是使用了不含ROX 试剂而系统参数中未做修改所造成，及时在分析设置中将Passive reference dye的ROX 改成None，再重新分析即可正常显示。有些没有ROX 校正的PCR 仪中也较容易出现此类问题。