实验问答21,857,592 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问qPCR相关实验问题

静心观照

是荧光值阈值线，这个是可以取消的，设置一下就可以了

6 回答608 围观

问Pcr的ct值在30-35之间的结果可用么？

balalaLy

基因表达低的这个ct值还行，要看一下溶解曲线还有内参的ct正不正常

7 回答774 围观

问小鼠组织的pcr引物序列可以跟小鼠细胞系pcr引物通用么？

balalaLy

当然可以的，都属于小鼠来源的。

5 回答1621 围观

问min6细胞基因表达

sswei

基因检测显示阳性意味着检测出的结果引发了关于基因的信号，表明相关的基因可能已经发生了某种改变

4 回答345 围观

问qPCR的引物要怎么才能两个种属通用呢？

土井挞克树

只能选择两个种属共同的保守区才能通用

3 回答375 围观

问请问在做qPCR探针法加样的时候，为了防止探针的分解，是不是加样不能太久？

huarenqiang5

是的，防止探针的分解，建议加样时间不能太久。

3 回答194 围观

问含双酶切位点的成熟肽段引物设计

开水白菜zjl

成熟肽段的引物是否存在与表达载体同源的同源臂序列保护碱基的数目不同影响核酸内切酶的切割效率，这种现象是存在的，可以查一下内切酶的保护碱基表核实一下

3 回答514 围观

问荧光定量PCR数据分析问题

周末也要努力呀

对照组CT值不显示可能因为你上样不准确，正常来讲对照组应该是最好做的。也可能因为引物特异性不好，CT过大导致超过机器预设值。排除因素后继续实验，同一次做出来的可以做分析，不同时间补对照组是不准确的。

3 回答402 围观

问rtpcr和qrtpcr哪一个更精准

土井挞克树

当然是qrtpcr更精准，敏感度高然后准确度高

5 回答607 围观

问2811bp序列pcr扩不出来？

小小翻车鱼

关于您提到的2811 bp序列扩增不出的问题，以下是一些建议和方法，您可以尝试调整这些方面以提高扩增效率：1. 引物设计与优化：检查引物设计，确保引物长度、GC含量、特异性和引物间距离都合适。同时，确保引物没有形成二聚体。可以尝试重新设计引物，或采用软件如Primer3等进行引物优化。2. 模板量：增加模板DNA的量。较低的模板量可能导致扩增效率降低。尝试增加模板DNA至50-100 ng。3.

4 回答466 围观

问可以在同一个地方提DNA或者RNA与做qPCR吗？

skyye

这个影响不大吧？现在很多都用试剂盒提取RNA了，一般不会影响qPCR的，但如果用Trizol的话需要在通风橱，做qPCR的话就在实验台就行，注意无酶操作

6 回答512 围观

问麻烦问一下，荧光定量PCR ct值误差基本都在0.5范围内，溶解曲线图必须是单峰，复孔的趋势都一致，齐齐的那种吗？

于小鱼鱼1998

不一定必须齐齐的，只要曲线平滑就可以

3 回答479 围观

问请问qpcr扩增曲线溶解曲线都是锯齿状的是什么原因啊？

土井挞克树

实验操作问题：PCR反应管没有盖紧，反应液泄露；PCR反应液有挂壁模板问题：RNA纯度低，扩增信号太弱仪器本身的问题：长时间未校正，荧光不稳定；使用过度，荧光收集不稳定

4 回答927 围观

问H9C2心肌细胞提取RNA电泳多一个条带

晓雨知春来

可能是RNA降解或DNA污染造成的。

5 回答449 围观

问qpcr时引物浓度多加了5倍，结果还能用吗？

dxy_mqg1dtg8

这种情况下，可能会对您的实验结果产生一些影响。1.引物和探针的浓度增加：引物和探针的浓度过高可能会导致非特异性扩增或引物和探针之间的相互作用，从而影响结果的准确性。2.PCR效率的变化：引物和探针浓度的增加可能会改变反应体系的PCR效率。这可能会导致扩增曲线的形状发生变化，包括延迟扩增的时间和扩增曲线的平台高度等。3.信号强度的增加：引物和探针浓度的增加可能会导致信号强度的增加。这可能会导致信号饱

5 回答788 围观

问基层医院研究对象相对缺乏，收集素材困难

loveliufudan

对于基层医院研究对象相对缺乏的情况,我建议可以从以下几个方面着手:1. 充分利用医院内部资源,对现有病例进行深入细致的回顾性研究,力求找出有价值的点。2. 考虑与其他基层医院进行合作,通过多方数据整合扩充样本量。可以建立区域性数据库。3. 尝试开展前瞻性研究,通过设立严格的入组标准等方法来锁定特定人群。虽样本量较小但数据价值较高。4. 寻找高层次医院的支持,利用他们的研究平台开展临床研究项目,拓展

3 回答274 围观

问不知道如何选课题

sswei

1、确定研究范围选题的第一步就是先确定研究范围。选题要有实质性意义，切勿跟风而上，创新不足。2、提出问题课题研究其实就是问题的研究。确定研究范围只是确定研究方向，接下来要围绕此范围提出很多问题，问题越多，找到课题的几率就越大。3、课题论证问题有很多，如何选择合适自己的课题呢？就要对这些问题进行论证。结果问题如果具有研究价值且有创新性、科学性、可行性就说明这个问题适合自己。课题自然也就出来了

3 回答371 围观

问写作中会遇到一些统计方法不合适，需要不断调整

汤姆卜丽波

对啊，写错了统计方法，评审专家会质疑你的实验结果真实性，在统计时就做好分组

3 回答256 围观

问发现某个领域，有人做得不对，又不能很明显的写论文反驳。审稿专家没有看懂论文，提出意见是错的，又不敢得罪，怎么办？

sswei

第一种：找专业的人员指导自己有一些专业的人员，因为有发过或者从事过论文审稿的丰富经验，见识的多，可以专业地应对发论文过程中遇到的各种问题。不仅能够第一眼判断出问题出在哪里，也能够给作者正确的指导意见，避免了走弯路。这种方法专业且高效，备受很多作者喜欢，但也需要支付一定的成本。第二种：找有经验的同事或导师指导有发表过SCI经历的同事或导师，对论文审稿中出现的情况可能有所了解。如果你遇到的问题，正好他

3 回答322 围观

问在做分子对接，为什么xyz轴的数据都是0

晓雨知春来

很大可能是使用的软件出错，建议重启软件。

3 回答530 围观

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