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        GST pull-down实验中,阴性对照GST蛋白怎么获得

        相关实验:用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

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        dxy_yn5g3wy9

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        GST融合蛋白纯化磁珠,通过磁珠偶联谷胱甘肽(GSH),利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶之间酶和底物的特异性作用力,分离出带有GST标签的蛋白

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        loveliufudan

        有帮助

        在GST pull-down实验中,GST(谷胱甘肽S-转移酶)蛋白通常用作阳性对照,以验证GST-tagged蛋白与目标蛋白的相互作用。对于阴性对照,您可以使用未标记的GST蛋白。

        未标记的GST蛋白可以通过重组表达和纯化来获得。这通常涉及将GST基因插入适当的表达载体中,如pGEX系列质粒,在宿主细胞中表达GST蛋白,然后利用亲和层析等纯化技术纯化蛋白。最终得到的未标记GST蛋白可以作为阴性对照使用。

        在实验中,使用未标记的GST蛋白作为阴性对照时,预期不会与目标蛋白发生特异性结合,因为未标记的GST蛋白没有与目标蛋白相互作用所需的结构域或序列。

        请注意,在设计和解释GST pull-down实验时,阴性对照的选择非常重要。确保选择一个与目标蛋白没有相互作用的适当对照蛋白,以评估实验结果的特异性和可靠性。

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        土井挞克树

        有帮助

        阴性蛋白gst可以直接购买gst试剂盒获得

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