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        请教一下,单链DNA怎么扩增成双链DNA。之前我是用PCR扩增一个循环,但是DNS纯化后,浓度很低

        相关实验:痘苗 DNA 检测实验

        user-title

        肖香燕

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        4 个回答

        user-title

        genecreate

        有帮助

        可以多做几个循环,希望可以帮到您!

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        用Taq酶或者Klenow大片段补平,所需试剂

        1 Taq酶或者Klenow大片段, 0.2 ul/1U

        2 dNTP(10mM) 0.2 ul

        3 buffer(10×) 2.0 ul

        4 单链DNA和互补引物(10uM)1+1 ul

        5 H2O 补足20 ul

        然后普通pcr直接p就可以了

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        一些单链DNA也有可能形成局部区域的双链结构。例如PCR中由于引物Q设计不合理,合成的引物会出现发夹结构。这是因为单链DNA中存在着互补序的碱基序列。使得单链DNA分子通过自身回折后,互补的碱基对Q相遇形成氢键,从而形成局部双链。

        94度可以使DNA变性,也就是双链分开。但是温度降下来,还会变回双链。

        用不对称PCR。PCR需要两个特异性引物,Foward和Re verse.(简称f和r),如果f和r的浓度相同,那么得到的PCR产物是双链的。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        单链扩双链就是需要PCR技术,浓度低你可以调整下引物试试看

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