提质粒？

首先检查质粒赋予大肠杆菌的标记（如抗性）是否存在？其次就是看方法有无问题。

检查一下你的引物，大概率是引物问题

具体是DNA提不出来还是什么呢， 主要步骤为分为重悬，裂解，中和沉淀，离心取上清液即需要的质粒DNA。控制好裂解液和菌体比例，以及操作温度基本不会错。