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        琼脂糖凝胶电泳拖尾的具体原因有哪些,怎样避免

        相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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        lzy必有我师

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        4 个回答

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        天一湖医者

        有帮助

        原因有以下:

        1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。

        2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;

        3、可能是原液浓度太大造成的;

        4、可能DNA已降解。

        5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。

        6、 DNA降解避免核酸酶污染。

        7、 DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。

        8、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应 <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。

        9、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。

        10、 有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。

        11、 DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

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        bamboopiggy

        有帮助

        1.胶配的是否匀,2.跑胶的buffer是否正确,3,pcr产物的浓度是否过高 4 pcr产物的是否太大 5,模板量是否过多,

        user-title

        未来9

        有帮助

        原因有很多:比如样品品质不好 ,上样浓度较高,原液浓度太大,DNA已降解等等

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        whilt-shirt

        有帮助

        1.DNA模板不纯;2.引物特异性不好;3.操作不当。建议复盘所有操作,重新设计引物

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