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        构建的融合蛋白,为什么看不到红色荧光!

        相关实验:用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

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        dxy_4uyyu09r

        很奇怪,是一个新基因没有合适的抗体,构建了一个融合蛋白竟然连荧光都没有了,做wb也曝光不出来条带,有没有有经验的帮忙解答一下

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        2 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你质粒构建的时候,去掉你那个基因的stop code了吗?另外注意rfp的读码框别移位了。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        与所选荧光蛋白特性有关,比如维多利亚多管水母中分离出了第一个绿色荧光蛋白GFP,含有约238个氨基酸,27KDa,其中第65-67位(Ser-Tyr-Gly)通过自身环化和氧化形成发色基团。另外,GFP不需要与任何底物作用,仅在长紫外光或蓝光下就能发出绿光。比如珊瑚虫中也有绿色荧光蛋白ZsGreen,它的亮度高于EGFP。由于突变GFP得不到红色荧光。

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