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科研学霸天团，48小时有问必答

问质谱图在生物医学中作用

sswei

质谱图用二维方法来看。横坐标代表的是分子离子峰及碎片峰，这有助于判断物质的分子量及可能的主要结构。纵坐标代表的是分子碎片的稳定程度，这有助于判断碎片相近物质区分，比如可以通过质谱图直接判断二甲苯的三种构型，就是利用这个方法。质谱图分析1、核对质谱图首先要核对质谱图是否合理，比如基峰，一张谱图只能有一个基峰，如果检测器调整的不合适或者样品浓度过大，则会有很多基峰。另外要观察同位素峰是否存在，有的同位

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问流式设门

loveliufudan

在没有对照的情况下，可以使用单荧光染色的细胞作为门控制。选取一个单荧光染色的细胞，比如说只标记CD4，而不标记其他细胞表面标记物的细胞，将其设为负对照门，这样可以帮助区分阳性和阴性细胞。如果你需要定量分析，可以使用流式细胞计数器进行计数。但需要注意的是，使用单荧光染色细胞作为门仅适用于仅有一个荧光通道的情况，如果有多个荧光通道需要使用时，需要针对每个通道设置不同的门。

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问rcs曲线两个p值分别代表什么意思

sswei

限制性立方（Restricted cubic spline，RCS）就是分析非线性关系的最常见的方法之一。P-Nonlinear <0.05，可以说自变量与因变量之间存在非线性关联。

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问马尔文Zetasizer Nano ZS90测出粒径数值怎样分析做图

loveliufudan

以下是一些常见的数据分析和图表制作方法：1.数据分析平均粒径：该值代表样品中颗粒的平均大小。您可以通过选择软件中的“平均粒径”选项来获得该值。多峰分布：如果您的样品中存在多个颗粒大小的峰值，则可能存在多峰分布。您可以通过选择软件中的“多峰分布”选项来确定是否存在多峰分布。粒径分布：该值表示颗粒在不同大小范围内的分布情况。您可以选择软件中的“粒径分布”选项来获得该值。2.图表制作粒径分布图：该图显示

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问做克隆基因时，明明蓝白斑都有，而且做菌液PCR也有条带，为什么老是测序失败啊

loveliufudan

尽管您看到蓝白斑和PCR条带，但是测序失败可能有多种原因，例如：质量问题：测序需要高质量的DNA样本，而低质量或受到污染的DNA样本可能会导致测序失败。您可以尝试使用纯化和质检DNA样本的方法来解决此问题。序列重叠：如果您的目标基因有高度相似的序列或存在同源基因，这可能导致测序失败或难以解析。您可以尝试设计更特异性的引物或使用高通量测序技术来解决此问题。测序仪问题：测序仪的性能或参数设置可能会影响

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问lps与caco2求问

loveliufudan

黏附蛋白的表达和分泌受到多种因素的影响，可能不仅仅受到LPS的影响。因此，黏附蛋白没有下降可能是由于以下几个原因：1.实验操作不当：在进行实验时，可能存在操作不当，例如LPS的处理浓度、时间不够或者细胞密度不够等。需要确保实验操作的准确性和一致性。2.基因表达变化需要一定的时间：黏附蛋白的表达和分泌可能需要一定的时间才能发生变化。在LPS处理Caco-2细胞24小时后可能仍未观察到显著的黏附蛋白表

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问在第二向电泳中，为什么溴氛蓝条带都跑到玻璃板下缘，蛋白质却只跑一半，怎么弄？

loveliufudan

在第二向电泳中，溴氟蓝条带跑到玻璃板下缘，蛋白质却只跑一半可能有以下原因：电泳时间不足：如果电泳时间不足，可能会导致溴氟蓝染料条带和蛋白质未被完全迁移。建议增加电泳时间，以确保条带和蛋白质被完全迁移。蛋白质溶液中含有大量盐或油脂：如果蛋白质溶液中含有大量盐或油脂，可能会影响电泳的迁移效果，从而导致蛋白质只跑一半。建议在蛋白质提取过程中彻底去除盐和油脂，或者使用其他蛋白质提取方法。电场强度不合适：如

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问这篇题为RNA介导的基因沉默实验中的注解和引用文献在哪里可以看到？

土井挞克树

可以在pubmed和中国知网上搜索到这篇文献。

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问请问一下，做的是氧化石墨烯–COOH和胶原蛋白–NH2反应，用95%乙醇做溶剂，文献中没看到要调pH，这个反应不调ph影响大吗

sswei

这个反应要调PH，不调PH有影响。

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问小鼠受精卵慢病毒显微注射后发育至2细胞就不发育了怎么回事？

loveliufudan

可能有多种原因，包括慢病毒的毒性、注射技术和实验条件等。首先，慢病毒是一种有机病毒，可以导致宿主细胞死亡，影响胚胎的发育。您使用的带GFP标签的慢病毒浓度在10^6-8的单位，也可能对小鼠受精卵造成了毒性影响。因此，建议您优化慢病毒的浓度和处理方式，以减少慢病毒对胚胎的不良影响。其次，注射技术也可能是一个问题。小鼠受精卵非常脆弱，需要非常小心和精确的技术才能成功进行显微注射。注射的位置、深度和角度

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问SIMCA 14处理代谢组学数据计算VIP值要考虑置信区间吗？

loveliufudan

在使用SIMCA软件计算VIP值时，并不需要考虑置信区间。VIP值是通过对模型中每个变量（代谢物）的贡献度进行统计计算得出的，而VIP值的大小主要取决于变量的贡献度和数据的样本大小等因素。在已经通过置换检验验证了OPLS-DA模型的可靠性之后，计算VIP值可以被认为是合理的。然而，置信区间仍然是代谢组学数据分析中的一个重要问题。在样本量较小或噪声较大的情况下，计算VIP值可能会受到较大的偏差，因此

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问小鼠皮肤光老化模型中每次照射时长

sswei

将紫外线照射仪置于小鼠上方30厘米处，每周照射6次，最初照射剂量为20分钟/天，每周增加10-30分钟/天，剂量维持在120分钟/天，持续8周。

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问硝酸还原酶活性的测定实验结果在那个范围比较合理

dxy_vg0qqx08

测试一下的吧应该是80-90比较合理

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问Caco2细胞药物转运

汤姆卜丽波

有可能是你的溶剂本身对药品后续的电阻测量完成了干扰

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问AngII皮下埋泵缓释为什么导致腹主动脉瘤造模不成功？

loveliufudan

这里我提供一些建议供您参考：重新评估给药剂量和给药方式：您可以尝试调整药物的剂量，增加给药浓度，或者改变给药方式（例如静脉注射）来观察血压的变化。同时，参考其他相关研究，了解他们在类似实验中使用的药物剂量和给药方式。检查皮下缓释泵的功能：确保皮下缓释泵的功能正常，药物能够稳定释放。请定期检查泵的工作状态，以及药物在泵中的剩余量。选择其他动物模型：ApoE敲除小鼠可能对高血压的发展和药物干预具有特异

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问这两个蛋白质三级结构的化学键分别是什么键，这两个键的功能应该不一样吧，对于蛋白质的功能有影响吗

sswei

化学键分别是氢键和盐键，用以维持蛋白质三级结构的形成与稳定。

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问求助:请问这个logistic回归分析中Hb和ALB的结果是不是有问题呀？

loveliufudan

在 logistic 回归分析中，自变量的系数 b 的符号取决于因变量的编码方式。当因变量为 1 或 True 时，b 值为正表示自变量对结果变量的值产生正向影响；反之，b 值为负表示自变量对结果变量的值产生负向影响。因此，在您的情况下，如果衰弱编码为 1，则您期望 HB 和 ALB 的 b 值为正，OR 值应大于 1。如果您的结果与此不符，可能需要重新检查数据和代码，或者尝试不同的编码方式。需要

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问请问各位科研大佬小鼠灌胃针可以重复使用吗

Dr_劉医生

小鼠灌胃针可以重复使用，但需要进行消毒。灌胃针的消毒方法有多种，如用酒精、高锰酸钾、紫外线等。在使用前，需要对灌胃针进行消毒处理，以避免交叉感染。

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问有大佬做过Protein Thermal Shift的Tm的实验吗，求解

土井挞克树

把曲线输出的纵坐标相应延长，避免曲线聚集

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问siRNA 敲低技术，敲抵之后是否影响细胞活性？

loveliufudan

关于细胞活性的影响，一般可以通过多种方式来评估，例如细胞增殖实验、细胞凋亡实验、细胞周期分析、细胞迁移实验等。对于敲低之后是否会导致细胞死亡的问题，需要根据具体实验情况来判断。如果目标基因是一种必需的基因或者参与了关键的细胞过程，那么敲低可能会导致细胞死亡。而对于其他的基因，敲低可能只会对细胞的生长和分化产生一定的影响，而不会直接导致细胞死亡。需要注意的是，SiRNA敲低技术虽然是一种有力的工具，

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