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科研学霸天团，48小时有问必答
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问
胰岛素制备实验中，有什么方法可以有效地去除胰脏周围的脂肪?
迟C迟
首先取材的时候要尽量去除脂肪组织。胰岛素制备过程中，首先准备粗制品：将新鲜或冰冻猪胰（牛胰更好）除去结缔组织等杂质，绞碎成冰胰浆。称重量置提取罐中，加入1．5—2．0倍量的酸性酒精溶液，使PH为2．5—3．0，醇含量为70%左右，在温度为13—150度搅拌提取3h,压滤，使浸液尽量滤出。残渣再用上法提取一次。
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问
对于中药活性成分治疗急性溃疡性结肠炎，FHC细胞模型可以从哪几个方面来做机制呢？
丁香粉猪猪
1，自由基损伤，2，抗炎与免疫，3血液流变学
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问
石蜡切片和冰冻切片的比较？
崔果儿
手术台上当时取的叫（快速）冰冻切片，顾名思义，很快就出结果，医生在台上等候，根据病理科给出的冰冻切片的结果判断良恶性，从而确定切除范围。石蜡切片是术中切除的组织取一小部分，术后送病理科，由病理科在几天内（疑难时间延长）出结果，用于盖棺定论这个组织的良恶性，最为最终诊断。简单说，冰冻迅速而及时，但是有错误的几率，恶性判断为良性等；石蜡稳，病理科说是啥病外科医就认是啥病。
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问
定量分析两个有一定关系的基因
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问
除了使用不含叶酸的培养基外还有没有其他方法避免微量叶酸干扰
whilt-shirt
叶酸含有1个或多个谷氨酰基，天然存在的叶酸大都是多谷氨酸形式。叶酸的生物活性形式为四氢叶酸。叶酸为黄色结晶，微溶于水，但其钠盐极易溶于水。不溶于乙醇。在酸性溶液中易破坏，对热也不稳定，在室温中很易损失，见光极易被破坏。
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问
组织负八十保存后还能进行免疫组化检测吗？实在没有其他样品的情况下，怎么样尽量避免冰晶的影响？
whilt-shirt
可以的，只是组织结构会有些影响，可以考虑采用冰冻切片机切片，然后进行后续的步骤
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问
关于细胞培养怎么选择更合适的培养基？
whilt-shirt
首先看购买细胞公司提供的说明书，如果没有，去各个公司官网查，再不行就各个培养基都试试，先用1640
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问
蛋白质样本提纯方面近年来有什么新的进展？
菲菲飞呀飞
膜分离纯化方法超滤是利用离心力或压力强行使水和其它小分子通过半透膜，而蛋白质被截留在半透膜上的过程。由于超滤过程中，滤膜表面容易被吸附的蛋白质堵塞，以致超滤速度减慢，截流物质的分子量也越来越小。所以在使用超滤方法时要选择合适的滤膜，也可以选择切向流过滤得到更理想的效果。 目前超滤方法研究工作主要集中在膜材料选取方面。潘巧明[4]探讨了大豆蛋白浓缩的工业化生产中，各种条件对聚矾中空纤维膜性能的影响。
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问
RNA的电泳检测问题
府宅
跑15%的胶时电压换为120V或者更高就可以了。
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问
何为黏附分子？？？？
青柠清心
粘附分子根据结构特点分为整合素家族、选择素家族、免疫球蛋白超家族、钙粘蛋白家族，此外还有一些尚未归类的粘附分子。功能：⑴参与免疫细胞的免疫发育与分化。如胸腺细胞发育成熟过程中涉及到胸腺细胞上CD8和CD4分子与胸腺基质细胞上的MHCⅠ、Ⅱ类抗原间的相互作用；T细胞活化分化过程中必须有粘附分子提供的细胞间协同刺激信号的存在。⑵通过白细胞与血管内皮细胞上的粘附分子之间的作用参与炎症过程 ⑶通过淋巴细胞
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问
新型microRNA能帮助治疗肺癌吗？
府宅
肺癌中的microRNA-486是一种强效的抑癌分子，有助于调节肺癌细胞的增殖和迁移，并且诱导这些癌细胞程序性细胞死亡或细胞凋亡。有利于帮助治疗
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问
新手想做这个试验，大概要花费多少时间成本跟金钱成本呢？
煤球儿啊
新手啥都不会的话，需要摸索的东西就比较多，费时费力
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问
单细胞测序怎么样最大程度的减少误差呢？要从哪里方面做呢？
whilt-shirt
样本准备原则（1）建议使用宽枪头重悬，以减少对细胞的损伤；（2）每次移液前先混匀细胞悬液，然后从管中部吸取；（3）所有环节都最好在无菌环节下操作、使用无核酸酶的试剂、减少移液步骤以及当可能损伤细胞的时候尽量使用宽枪头等。此外，可用一次性转液管去除离心后的上清液，以减少细胞沉淀的干扰；（4）取样的时候最好设置两个重复，对每个样品计数 2 次，即共计 4 次计数；（5）弃上清时候注意不要破坏细胞沉淀；
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问
wb中杂带有很多，没法区分
dxy_gwrp7ndq
1.低效阻塞。实验中会应用到多种不同的封闭剂，某些非离子去污剂或蛋白质等封闭剂容易产生低效阻塞的影响。如果改变阻塞条件就可以解决此问题。2. 抗原浓度过低。信号增强可能会导致人工带的出现。因此可以适当考虑通过分级分离或免疫沉淀富集抗原。
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问
流式分析小鼠组织浸润淋巴细胞该如何设置组别
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问
骨组织wb内参不齐怎么整？
whilt-shirt
蛋白浓度一样不代表内参浓度一样，我们实验室一般现用BCA法测总蛋白浓度，第一次上样后根据内参调整上样量，这样内参就齐了
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问
什么浓度可以使斑点大小统一？多次点样比较好还是一次？
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问
临床手术取到的肿瘤组织如何保存使得RNA最不容易降解？同时也能提蛋白？
协和再爱我一次
要么超低温冻存要么加好Trozol研磨后冻于-80，用于后期提取RNA直接加裂解液研磨后冻于-40以下冷冻，用于后期提蛋白以上均不可反复冻融
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问
RNA跟DNA的区别？
菲菲飞呀飞
RNA又称核糖核酸，一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成，RNA的碱基主要有4种为腺嘌呤，鸟嘌呤，咆嘧啶，尿嘧啶，RNA是以DNA的一条链为模板，以碱基互补配对原则，转录而形成一条单链，它的主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达。DNA又称脱氧核糖核酸，它的主要功能是长期性的信息储存，DNA的复制方式为随机半保留复制。
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问
探针法pcr低浓度模板复孔之间的差异大，除了加样问题还有什么原因会导致？
府宅
分装试剂时是否混匀，加模板时是否有挂壁
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