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科研学霸天团,48小时有问必答
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HPLC里怎么用自动积分计算放化纯度
土井挞克树
利用HPLC进行蛋白质纯度鉴定主要根据检测器所检测到的色谱图来实现,根据谱图的特异性吸收峰的数量进行判断。HPLC法可以检测丰度小于0.1 ug的杂蛋白,灵敏度较高,是比较精确的蛋白质纯度测定方法
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问
用于污水处理 可以用哪些藻类呢
huarenqiang5
可以用以下四种藻类:(1)小球藻(2)螺旋藻(3)栅藻(4)硅藻
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问
免疫荧光结果显示药物对细胞骨架有破坏,为什么WB跑不出来趋势?(tubulin, actin)
土井挞克树
可能是上样量太低所以跑不出来,建议提高上样量
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问
哪位大神做过病毒蚀斑纯化吗?可以提供一个病毒蚀斑纯化详细的protocol吗?拜托了,先谢谢大家了!
huarenqiang5
流程1. 铺板将已长满80~90%RDcell消化均匀铺于6孔板中。2. 病毒感染细胞长成单层达80~90%吸去培养液,将病毒做10倍稀释,共做5个梯度,并向每孔中加入200μL 稀释好的病毒液(阴性对照加DMEM200μL ),置于37℃温箱吸附两小时后弃残液。3. 制备2%琼脂糖使用低熔点琼脂糖配方:0.2g 加入10ml 无菌PBS 中,121℃高压灭菌15min ,取出后置于55℃水浴锅中
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问
用伽马计数仪测出每个组织/器官的cpm值之后怎么计算%ID/g
高山云初
id/g是每克组织的放射性计数占总注入的放射性计数的百分比。ID/g等于器官的放射性计数/注射药物的放射性计数)/脏器质量。其中注射药物的放射性计数等于注射药物的质量乘(标准管的放射性计数/标准管的质量)。
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问
这几个SYBR green I 染料 哪个适用于藻类染色啊
此用户已注销
试试第二个,我之前就是用的那个
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问
f4/80+以及ly6G+双阳性的是什么细胞?
sswei
f4/80+以及ly6G+双阳性的是单核巨噬细胞。
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问
Percoll从肾脏组织中分离免疫细胞,什么比例和离心速度合适?
sswei
整个梯度离心要求慢升慢降,需要在离心机里设置加速度,一般有 1 到 9 级可选。Percoll 升降都要 3 的加速度。从1.02-1.3 g/ml范围内的密度梯度离心分离
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问
尼氏染色的为什么会花片,像是有水渍或者没染匀
dxy_uvsexwc5
有可能是组织取出以后固定慢了。
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问
怎么测水体中的氨氮 最恰当的方法是什么
土井挞克树
1.纳氏试剂分光光度法原理:水中氨与纳氏试剂在碱性条件下生成黄至棕色的化合物,其色度与氨氮含量成正比。该法中,无色澄清的水样可直接测定,色度、浑浊度较高和干扰物质较多的水样需要经过蒸馏或混凝沉淀等预处理。
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问
数据库搜索是蛋白质组学中重要的一步,搜素结果的可靠性如何评估?
土井挞克树
MAP指标(Mean Average Precision)是针对多次查询的平均准确率衡量标准,是评价检索系统质量的常用指标。可以利用该指标评估
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问
怎么测水中的总氮总磷 最恰当的方法是什么
loveliufudan
测定水样中总氮和总磷的常用方法主要有:1. 紫外分光光度法:原理是测定水样经过酸化、高温消解后产生的铵盐、硝酸盐以及磷酸盐的紫外吸收值,根据标准曲线计算氮、磷含量。该方法操作简便,可同时测定氮、磷,但检出限较高。2. 连续流动分析法:根据水样经还原、比色等反应后的颜色变化,利用流动注射分析仪连续监测和计算氮、磷含量。该方法精度好,灵敏度高,但仪器要求较高。3. 离子色谱法:根据水样中氮、磷不同形态
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问
蛋白组学的组织和细胞标本处理?
土井挞克树
蛋白组学一般选择强效裂解液,wb相对温和一些
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问
Hela细胞为什么转染不进去啊?
loveliufudan
HeLa细胞转染不成功的原因可能有以下几点:1. Lipo2000与DNA的比例可能不适合HeLa细胞,可以试试调整这比例,增加Lipo2000量。2. 汇合时间可能需要延长到10-15分钟,以提高Liposome包裹DNA的效率。3. HeLa细胞状态可能不佳,需要用对数生长期的健康细胞。提前24小时换新培养基可以改善细胞状态。4. 转染液加入细胞中的方式可以优化,滴加转染复合物要轻缓,平铺于整
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问
蛋白组学数据,为什么一个样品的3个重复,对于某一个蛋白,2个重复值很高,另1个却为缺失
晓雨知春来
有可能是样本本身存在实际的生物学变异。不同细胞亚群中该蛋白表达水平真的存在差异。
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问
蛋白组学数据中,缺失值怎么补全?
此用户已注销
在处理这个问题上出现了一些填充缺失值比较准确地方法,如K个最近邻的缺失值填充法(KNN)、有序的K个最近邻填充法(SKNN)和奇异值分解法(SVD)。
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问
蛋白组学数据,质谱自动分析后,还需要自己进一步标准化或归一化处理吗?
huarenqiang5
蛋白组学数据,质谱自动分析后,建议进一步标准化或归一化处理比较好。
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问
蛋白组学数据,有哪些归一化方法?
此用户已注销
蛋白归一化的方法主要包括两种:内标法和总蛋白法
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问
蛋白组分析,不同组数据仪器做了归一化分析,在做热图时,还需要再做一次让数据对称吗?
huarenqiang5
不同组数据仪器做了归一化分析,这时候做热图建议再做一次让数据对称。
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问
蛋白质分离纯化的基本原则?
loveliufudan
蛋白质分离纯化的基本原则主要包括:1. 保持蛋白的生物活性:选择温和的缓冲系统,控制温度,加入稳定剂等,以保持蛋白的天然结构和活性。2. 渐进法纯化:通常需要多步骤分离,每一步移除一部分杂质,逐步提高目标蛋白纯度。3. 充分利用蛋白质的化学与物理性质差异进行分离:如大小、电荷、亲和特性等。4. 保持蛋白质溶解状态:控制pH、离子强度、去离子水溶液成分等关键因素。5. 避免蛋白质降解:加入抑制蛋白酶
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