实验问答22,856,813 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问友友们，想预测一下趋化因子CCL20的信号通路，用KEGG或者GO应该怎么操作？实验步骤是什么？

周末也要努力呀

1. 访问KEGG数据库（https://www.genome.jp/kegg/）或GO数据库（http://geneontology.org/）。2. 在搜索栏中输入CCL20或其它相关的关键词，如"chemokine CCL20"。3. 在搜索结果中找到与CCL20相关的通路或功能注释信息。4. 进一步分析相关通路或功能注释信息，了解CCL20在特定信号通路中的作用和调控机制。

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问我把IFITM1蛋白和商品化灭活疫苗通过搅拌混到一起，来免疫14日龄的小鸡，在免疫完发现，蛋白在管底与疫苗分层，这情况要怎么补救？

高山云初

没法补救吧，只能再重新进行一次。

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问有大神知道棕榈酸诱导H9C2心肌细胞的高脂模型怎么做吗？

周末也要努力呀

棕榈酸可以用来诱导H9C2细胞高脂模型。以下是一种常用的实验步骤：1. 培养H9C2细胞：将H9C2细胞培养在适当的培养基中，通常使用DMEM培养基，含有10%胎牛血清和1%抗生素。2. 细胞预处理：将H9C2细胞分为对照组和实验组。对照组继续在正常培养基中培养，实验组则进行棕榈酸处理。3. 棕榈酸处理：将棕榈酸溶解在适当的溶剂中（如无菌的乙醇），制备成一定浓度的棕榈酸溶液。将此溶液加入到实验组的

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问病毒分离时没有病变，PCR也没有条带

土井挞克树

pcr没有条带说明转导失败，可能是质粒的问题，也可能是引物的问题

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问C57来源的BMDC做抗原提呈实验，请问该怎么做？

周末也要努力呀

1. 骨髓细胞培养：从C57小鼠的骨髓中收集细胞，并将其培养在含有GM-CSF和IL-4的培养基中，以促进骨髓细胞分化为BMDC。2. 培养BMDC：将骨髓细胞在培养皿中培养7-10天，每隔2-3天更换新的培养基。3. 收集BMDC：收集培养皿中的BMDC，可以通过轻轻洗涤的方式将非附着的细胞收集起来。4. 处理抗原：将需要研究的抗原（如蛋白质、多肽或细胞裂解物）加入到BMDC的培养基中，使其与B

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问PEDV一种病毒，大家是怎么分离的呀，求救

dxy_mqg1dtg8

PEDV（猪流行性腹泻病毒）的分离通常涉及到以下步骤：1. 采集病毒样本：从猪体内的粪便、肠道、血液等样本中采集病毒样本。2. 病毒富集：将采集到的样本进行离心、过滤、超速离心等操作，以富集病毒。3. 细胞培养：将病毒样本接种到感受器细胞上进行培养，例如Vero细胞、PK-15细胞、LLC-PK1细胞等。4. 病毒分离：观察细胞的形态变化、病毒感染的效果等，通过形态学和免疫学等方法进行初步鉴定，筛

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问HepG2细胞造急性酒精损伤模型需要无血清同步之后再造模么

高山云初

HepG2细胞造急性酒精损伤模型需要无血清同步之后再造模，造模后给药

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问髌下脂肪垫炎症评分

高山云初

髌下脂肪垫炎症评分标准可以用可以用hoffa进。

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问光遗传和钙成像病毒讨论

此用户已注销

怎么样楼主，你做的会影响么？会么

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问投稿时动物安乐死怎么写呢，跪求模板，我是这样描述的

sswei

宠物安乐死协议书宠物主人姓名电话号码宠物主人住址宠物种类宠物品种性别宠物特征年龄我清醒地认识到我的宠物病情危重,在目前已有的条件下无治疗价值,为避免宠物痛苦,我同意给我的宠物实行安乐死,一切责任由自己承担,与宠物医院及安乐死实施人无任何关系。宠物主人签字年月日

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问Caseviewer 显示如此，跪求大佬告知解决办法

sswei

意思是查看器找不到具有指定文件路径的幻灯片。需要重新指定文件路径。

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问帕金森大鼠‖APO诱导转圈没有装置，可以人工观察数圈吗？

高山云初

用转圈装置或者人工观察数圈都可以

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问DC细胞的抗原提呈实验步骤？

周末也要努力呀

DC细胞抗原提呈实验步骤如下：1. 培养和收集DC细胞：使用培养基（如RPMI 1640）培养DC细胞，通常使用骨髓源或外周血单个核细胞（PBMC）分离的细胞。收集细胞后，用PBS洗涤细胞。2. 处理抗原：选择合适的抗原，如蛋白质、多肽或细胞裂解物。将抗原处理成合适的浓度。3. 刺激DC细胞：将DC细胞与抗原共同培养。通常使用1-2μg/mL的抗原浓度。培养时间可以根据实验需要而定，一般为24-4

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问纯肽与钙螯合，加入9倍乙醇但没有螯合物的沉淀，如何能得到肽钙螯合物的沉淀呢？

dxy_sbyagsy6

同学你好，请问你解决了吗，我也遇到这个问题了，求求了🙏

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问有何种方法可以证明TLR4受体可以识别PGN?

周末也要努力呀

1. 细胞系实验：使用TLR4表达的细胞系（如HEK293T/TLR4细胞）和对照细胞系（如HEK293T/空白细胞）进行实验。将PGN添加到细胞培养基中，观察TLR4细胞系是否产生细胞因子（如TNF-α、IL-6等）的释放，而对照细胞系则不产生。这表明TLR4受体能够识别PGN并触发细胞信号通路。2. RNA或蛋白质水平的检测：使用实时定量PCR或免疫印迹等技术，检测TLR4基因或蛋白质的表达水

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问测定禽流感病毒H9N2的EID50，接胚后48h吸取尿囊液测血凝，发现都无血凝性，是怎么回事？-7稀释度死亡3个，-8死亡2个

土井挞克树

是否存在抗凝剂污染导致的凝集度改变，也有可能是细菌感染了

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问求问怎么用软件预测蛋白的靶标位点，用什么软件比较好，求问，有偿求助

Dr_劉医生

都是用机器学习的方法，比较常用的是CSS-Palm，入门相对简单，首先搜索“CSS-Palm”或者复制网站地址进入（http://csspalm.biocuckoo.org/）。 STEP1：点击“ONLINE”，左侧显示的是我们可以预测的修饰类型。比如我们以乙酰化为例，点击进入乙酰化位点预测界面。 STEP2：点击界面上方“PREDICTION”，这里需要用到的蛋白序列的FASTA格式，选中所

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问用邻甲酚酞络合酮比色法测肽钙螯合物的钙含量时，是否需要将肽钙螯合物的钙脱除下来转变为离子钙再进行测定？如何脱除？

huarenqiang5

操作步骤：1、制备样品：①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存，用于 Ca的检测。②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于 Ca的检测。③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的 Ca，可以使用 ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。2、配制 Ca显色工作液：临用前，取 Ca Assay Buffer和 OCPC显

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问siRNA转染细胞，24小时可以提RNA吗？

龙大人驾到

在进行siRNA转染后的24小时内，通常无法直接从细胞中提取足够的RNA用于下游分析。这是因为siRNA转染后，siRNA需要一定时间才能进入细胞并发挥作用，以降低目标基因的表达水平。此过程需要一定的时间，并且目标基因的降低可能需要更长的时间才能观察到。通常，在进行siRNA转染后，需要等待一定的时间（通常是24至72小时）以使siRNA充分发挥作用并降低目标基因的表达。这样，细胞中的RNA水平才

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问石蜡切片细胞不成形，部分组织脱落。求大神指点！应该怎么解决呢？

龙大人驾到

当在制备石蜡切片过程中遇到细胞不成形和组织部分脱落的问题时，以下是一些可能的解决方案：1. 固定和处理组织时注意优化：确保你在固定组织时使用适当的固定剂和处理方法。不同类型的组织和细胞可能需要不同的固定和处理条件。确保使用适当的浓度和固定时间，并遵循标准的组织处理步骤。2. 组织处理中的脱水和浸渍：在脱水和浸渍步骤中，确保逐渐将组织转移到石蜡中，以确保组织的完整性。逐渐增加浓度的醇溶液（例如，70

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