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各有关单位： 为了适应科技发展的需要，贯彻落实《实验动物管理条例》（中华人民共和国国家科学技术委员会令第2号，1988），进一步加强实验动物管理工作，我们在深入研究和广泛征求意见的基础上，制定了《关于善待实验动物的指导性意见》，现予印发，请认真贯彻落实。 附件：关于善待实验动物的指导性意见 科学技术部 二ＯＯ六年九月三十日 ----------------------------------- ...

作者：韩锋产阎小君侯瑜肖乐义郭晏海苏成芝 单位：中国人民解放军第四军医大学全军基因诊断技术研究所陕西省西安市710033 关键词：螺杆菌，幽门；细胞毒素相关蛋白A/分析；胶体金；免疫层析；抗体/分析 摘要目的建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相 ...

材料 1、实验动物： 孕13d的昆明种二级小鼠。 2、主要试剂 主要试剂 来源 DMEM/F12 GIBCO rh-EGF peprotech rh-bFGF peprotech B-27 supplement GIBCO HEPES Sigma Trypsin Sigma Ploy-L-lysine ...

一周龄大鼠，断颈处死，活力碘消毒无菌取出肝脏，于无菌维持液中漂洗，用眼科剪仔细清除肝包膜韧带沿肝边缘剪切肝尖组织(绕开肝蒂等)转入青霉素小瓶中，用眼科剪绞碎剪成0.1-1.0mm3大小的碎片，加入5倍体积无菌维持液用滴管轻轻吹打吸出上层血细胞再用无菌维持液反复清洗3~5次，加入10倍体积无菌胰蛋白酶消化液37℃消化，消化过程中不断震荡，至组织块边缘变薄(镜下观)离心(1000rpm10分钟)弃去上 ...

1、将静脉血20ｍl用ACD抗凝剂以容积比血：抗凝剂＝9：1抗凝处理 2、按血：分离液＝1：2注入国产淋巴细胞分离液上层，400g 20℃离心30分钟 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g，10min洗三次 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会： 1、实验中我用过肝素方法抗凝，但效果不好，因为肝素抗凝后交接层混浊，洗涤后没有细胞。后来是一位老师推荐我用ACD抗凝剂，效果 ...

1、将切下的组织在手术台上请护士将标本放入低温生理盐水中（可不要动它），在手术完成时将标本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中带回实验室； 2、在超净台中将标本放入培养皿中，加入α-MEM洗涤； 3、获得组织切开，仔细辨认于关节反折处及增生的白色光滑的滑膜组织，附于关节软骨面的增生的血管翳也为滑膜组织（可作另一管消化），仔细剔除脂肪组织，用α-MEM洗二次（以去除红细胞）， ...

除非特殊说明，在所有情况下，所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40～60倍。 应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等，比较色谱柱性能的改善，以确定清洗的效果。 确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液，清洗前所用的溶剂应与最初清洗时所用的溶剂相溶。 应确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中最后的溶剂相溶。 ...

(1)大鼠断颈处死后，无菌取脾置于消毒平皿中称重; (2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿，加入5～10ml D-hanks平衡液 ，置一80目的不锈钢筛于平皿中，脾脏置于筛网中，用剪刀剪碎脾，用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏，使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中， D-hanks冲洗一次； (3)用吸管吸取冲洗液，200目的钢筛过滤一次后收集至离心管中； (4)1000rpm，离心5～10 ...

准备的药品：pbs199培养液，I型胶原酶（SIGMA）。 主要的器械：手术剪，镊子，止血钳，丝线，鞘管（PTCA用的动脉鞘的扩张管，6F或7F）。 首先，以PBS漂洗脐带1-2次，用剪刀将脐带剪成数段15CM左右长短（本人认为这个长度较为合适）。 之后，以止血钳提起一段脐带的一端，将鞘管插入脐静脉中，并经该鞘向静脉内注入PBS10-8ml左右（最后注入空气吹净残留液体），后以丝线将另一端结扎（一 ...

材料： 新鲜脐带 方法： 冰冷无菌D-Hanks液中漂洗，用眼科剪仔细清除脂肪、包膜、血管等组织，转入青霉素小瓶中，加入少量无菌D-Hanks液，用眼科剪剪成0.1-1.0mm3大小的碎片，用滴管轻轻吸出上层细小脂肪碎块和油滴，再用无菌D-Hanks液反复清洗8~10次，加入10倍体积无菌胶原酶消化液（1mg/mL)，室温消化30min，1000rpm离心5min，弃上清，加1mg/mL胰蛋白酶3 ...

【实验目的】 1.掌握聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦的基本原理 　　2.学习用等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的操作和方法 【实验原理】 等电聚焦法是一种特殊的聚丙烯酰胺凝胶电泳法。它的特点是在凝胶柱中加入两性电解质载体-Ampholine，从而使凝胶柱上产生pH梯度。当向两性载体凝胶施加电场时，即可形成pH梯度，pH梯度的顺序是从阳极到阴极pH值逐渐增大。 蛋白质为两性电解质，其所带电荷的性质和数量 ...

六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器，它是由圆形密封垫（转子）和固定底座（定子）组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用，各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。 工作原理： 1、手柄位进样（Load）位置时，样品经微量进样针从进样孔注射进定量环，定量环充满后，多余样品从放空孔排出。 2、将手柄转动至进样（Inject）位置时，阀与液相流路接通，由泵输送的流动相冲洗 ...

实验步骤 采血： 需要在严格无菌条件下采血。肝素抗凝，室温保存，24hr-72hr转化效率高。也有保存更长时间，采血后不要将血液置冰箱中，长途运输也不要冷藏。 分离淋巴细胞： 采集血液4-5mL，与2mL1640（含1%双抗）在离心管内混合，然后缓慢沿管壁注入淋巴分离液（已37℃预热），3000rpm离心30min。 收集白细胞层，转移至另一离心管中，加入10mL1640（含1%双抗），轻轻吹打均 ...

PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用，蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性，PAg复合物分子最小易于穿透组织。PAg复合物的原液在4℃可保存达一年之久。电镜水平的PAg染色法PAg法在电镜技术的应用原则是二步标记法 ...

材料方法 1.材料： 1.1材料来源：取自健康成人行骨髓内固定术扩髓前收集骨髓腔内骨髓。 1.2主要试剂： DMEM培养基 胎牛血清（FBS） β-甘油磷酸钠（β-GP） 维生素C 青链霉素 胰蛋白酶（1:250）-EDTA 1.3主要仪器设备 双人超净台 Farma Scientific美国 单人超净台 Farma Scientific美国 二氧化碳孵箱 Far ...

材料和方法 1、仪器： 手术器械一套，倒置显微镜（Leica）CO2细胞孵育箱（Heraeus），超净工作台（苏州净化设备有限公司），扫描电子显微镜（Hitachi）。 2、主要试剂 DMEM高糖培养基（Gibco），胎牛血清（Hyclone，杭州四季青生物工程材料公司），胰蛋白酶、EDTA（Ameresco）；小鼠抗人CD105单克隆抗体（NeoMarkers），兔抗人CD34、CD31多克隆抗 ...

前段时间写过一个胶体金的市场情况，考虑到丁香园里做研究或者研发的战友会比较多一些，结合自己的研发经验，写一些相关的东西。 一、做胶体金研究好出论文吗？ 相对分子生物学的微观研究，胶体金出论文的难度似乎很大，总觉得一个研究做下来，就是出线与不出线，没什么可以写。为什么？ 首先，胶体金研究偏向生物技术应用研究，而分子生物学目前阶段还是停留在理论研究。所以你可以通过一些色带、测序结果等告诉别 ...

一、设备： 无菌操作设备。 二、大型设备CO2培养箱： 恒温5%、10%CO2维持培养液中pH值 倒置显微镜：用于每天观察贴壁细胞生长情况 解剖显微镜，用于准确地取材 常温冰箱：-4℃，用于保存各种培养液，解剖液和鼠尾胶 低温冰箱：-20℃--80℃，用于储存血清酶，贵重物品和试剂 电热干烤箱：用于消毒玻璃器皿 高压消毒锅：用于消毒培养皿，手术器械 过滤器：配制解剖液、培养液，必须过滤后才 ...

HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一，由于其精度较高，对实验人员和实验室条件要求较高，因此保养也很重要，应引起注意： 1．HPLC的日常操作条件： 温度：10～30℃； 相对湿度<80%； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 2．泵的保养： 1)使用流动相尽量要清洁； 　　2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗； 　　3)流动相交换时要防止沉淀； 　　4)避免泵内堵塞或有 ...

将出生2天以内的新生SD大白鼠10只，用75%的酒精浸泡消毒后，采用无菌方法迅速取出大脑，用冷的D-Hanks液清洗并剔除脑膜和血管，取大脑皮质，将组织剪碎为1mm3，用0.125%胰蛋白酶37ºC消化10分钟，过滤（200目尼龙滤网），离心（1000rpm 10分钟），去上清，加入DMEM/F12完全培养基（其中含10%胎牛血清，10%马血清，L-谷氨酰胺2mmol/L，青霉素100u ...