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1、如何选用培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI- 1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM） 2、为什么要热灭活血清？ 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研 ...

1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。 2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基，处理1~2小时。 3、将细胞培养液倒掉，马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶，并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后，马上加入终止液终止消化，并将分裂相细胞收集在一个15ml的离心管中，并在1200r/min离心4min。 4、将上清液倒掉，剩 ...

体外神经细胞的培养已成为神经生物学研究中十分有用的技术手段。神经细胞培养的主要优点是:(1)分散培养的神经细胞在体外生长成熟后能保持结构和功能上的某些特点 而且长期培养能形成髓鞘和建立突触联系这就提供了体内生长过程在体外重现的机会。(2)能在较长时间内直接观察活细胞的生长、分化、形态和功能变化便于使用各种不同的技术方法如相差显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、同位素标记、原位杂交、免 ...

概述 Spallanzani（1776）最早发表了冷“处理”对“细胞”生命活动影响的报道，他用雪冷冻玻璃瓶中的马精子10多分钟之后，再将玻璃瓶放回室温下，发现了一个令人惊奇的现象，那些原本已经不动了的精子又“复活”了，就好象是刚从输精管排出来的一样，冷处理延长至数十分钟，情况依然如此。于是，他认为冷不能杀死精子。大约100年 ...

A. 直接标记抗体（FITC标记抗体）： (1) 收集1×106个细胞，800rpm离心5min，4℃以上冷PBS洗一次。 (2) 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟，800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞，800rpm离心5min。 (3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞，冰上孵育10min，800rpm离心5m ...

1、合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。 2、优质血清 目前，大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。 3、无菌无毒细胞培养环境 无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体 ...

1、原代培养： 健康成年白家兔空气栓塞处死立即取出眼球1∶1000庆大霉素生理盐水冲洗干净置超净工作台无菌操作。角膜缘剪开去除角膜、虹膜将晶状体前囊膜连同赤道部囊膜撕下Hank液冲洗剪成1mm×1mm小块上皮面向下置25mL组织培养瓶内贴壁培养。把培养瓶轻轻翻转加入适量的加入含15%胎牛血清的DNEM营养液囊膜片在瓶内的上面而培养液在下面。置于37℃、5%CO2、95%空气、100%湿 ...

材料与试剂： 镊子、剪子、培养皿 离心管、培养瓶、吸管、滴管 200目筛网 胶原酶（10ml）（20mg胶原酶、200mg牛血清白蛋白、10毫升双蒸水）国外也用培养基配. 方法： 1、取无菌条件下新鲜切除的人腹部皮下脂肪组织约5－10克，放入培养皿，用1×PBS冲洗2－3次，充分洗去血污，剔除结缔组织和可见血管。 2、充分剪碎脂肪组织为1mm×1mm的小块。 3、将其加入到 ...

材料与方法： 材料 : 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管，玻璃针等。 眼科剪、眼科镊、手术刀片。 5%CO2孵箱、PH计。 恒温水浴箱。 PMi1640培养基，D-Hank’s缓冲液 、胎牛血清，内皮生长因子（ECGF），青霉素，链霉素戊巴比妥钠等。 方法： 1、取材：4～6ｗＷｉｓｔａｒ大鼠 大剂量2%戊巴比妥钠麻醉处死，将处死后的大鼠浸入75%酒精中，放入超净台。在无菌状态下剪开胸腹腔 ...

一般而言，所谓标准化的实验动物设施，即一能够在人道的原则下，提供动物“持恒（homeostasis）”的饲养环境，并以恰当预防医学（preventive medicine）、无公害（合乎环保与公卫考量的设备与方法），使动物试验能顺利进行的共用实验室及/或生产实验动物的房舍。藉复杂的空调系统作严谨地人工环境控制则似乎是必要的。然实验动物学相关参考文献与书籍，多仅对这个部份作概 ...

1、环境参数数据采集及报警： 利用飞天通用智能自动化系统进行数据采集。其特点是通用性、开放性、易学性；性价比高。 控制系统示意图见图1。由PC机、打印机、控制柜、检测仪表组成。 图1 控制系统示意图 2.系统功能： （1）数据采集与控制：温度、湿度各31个数据　　共31个动物房，温度湿度需要控制。每间温湿度要求不一样。其中一层有狗房、猴房、猫房、豚鼠、家兔，二层有繁殖房、实验室若干。　 ...

新建或改建的实验动物设施竣工启用前，须向所属的实验动物管理部门申请进行环境设施的检测，检测合格方能投入使用。实验动物设施是连续运行的，各种环境因素一直处在变动之中，也需要经常性的监测和维护。对实验动物设施的环境条件，国家有标准化的规定，检测项目包括温度、相对湿度、气流速度、梯度压差、空气洁净度、空气落菌数、氨浓度、噪声、照度和换气量等。 环境检测的项目 空气洁净度的指标包括有：空气落菌数，是检测空 ...

兔舍建筑的目的 理想的兔舍，是搞好家兔生产的重要基础条件。兔舍建筑合理与否，直接影响家兔的健康、生产力的发挥和养兔者劳动效率的高低。兔舍建筑是养兔生产的前期工作，至关重要，因而对兔舍建筑的目的必须非常明确。 兔舍建筑的目的，一是从家兔的生物学特性出发，满足家兔的环境要求，以保证家兔健康地生长和繁殖，有效地提高其产品的数量和质量；二是有利于饲养人员日常饲养管理、防疫灭病等方面的操作，从而提高劳动生产 ...

一、目的： 严格控制动物实验环境不受病源微生物的危害；保护动物的福利； 维持屏障环境的生物洁净度；确保动物生产与实验环境的一致性。 二、依据： 《实验动物管理条例》（中华人民共和国国家科学技术委员会令第2号，1988），《实验动物环境及设施》（中华人民共和国国家标准，GB 14925-2001）。 三、屏障环境的消毒： （一）启用前的消毒： 1、清洁屏障环境，检查设施、设备状况。开启空调通风系统自 ...

一、通过与菌体的蛋白质结合，使蛋白质变性、沉淀而达到抑菌或杀菌作用的有：来苏尔、乙醇、福尔马林、红汞、苯酚等。 1．来苏尔，即煤酚皂溶液（含煤酚47%～53%，其余是肥皂和水；煤酚是邻、间、对甲酚的混合物）。将来苏尔用水稀释成5%～10%的水溶液，用作病人用具、排泄物及环境消毒。 2．乙醇，俗称酒精。主要用于皮肤和医疗器械消毒。其75%的水溶液消毒作用最强。浓度过高可使菌体表层蛋白质迅速凝固而妨碍 ...

1.消毒液： 甲醛和高锰酸钾。 2.灭菌原理： 灭菌（Sterilization）是指杀灭档案上所含微主物（包括霉菌、细菌、繁殖体和芽胞）的方法。消毒（Disinfections）是指杀死霉菌，病原微生物的方法。一般消毒剂在常用的浓度下，只对细菌、霉菌的繁殖体有效，对于芽胞则需要提高消毒剂的浓度和延长消毒时间。 甲醛灭菌原理：甲醛与霉菌、细菌蛋白质结合，可使之变性致死。 高锰酸钾灭菌原理：能使菌体 ...

因实验或诊断目的而使用动物的实验人员要有道德上的职责，尽量照顾好动物，应尽量避免给动物带来不必要的痛苦或伤害。同时必须为动物提供舒适、卫生的笼具和足量、卫生的食物、饮水。实验结束时，必须以仁慈方式处死动物。 由于安全保障方面的原因，动物室应是一个独立分开的部分。如果它与实验室毗连，则设计上应当同实验室的公共部分分开，并便于清除污染与杀灭虫害。 和实验室一样，动物设施主要根据所研究微生物的危险度评 ...

按照“实验动物环境与设施”国家标准（1994）规定，实验动物环境设施分为四等，控制程度从低到高，依次为开放系统、亚屏障系统、屏障系统和隔离系统。 开放系统 通常为单走廊专用房舍，采用自然通风或设有排风装置，有防虫、防鼠设施，要求笼具和垫料消毒、使用无污染的饲料，人员进出有一定的防疫措施。这类设施仅适用于普通级动物。该系统通常分为三个区域：前区，包括检疫室、办公室、休息室等； ...

BSL-1生物安全实验室 根据国家标准GB19485-2004《实验室生物安全通用要求》规定： 1）无需特殊选址，普通建筑即可，但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。　　2）每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。　　3）在实验室门口处应设持衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置。　　4）实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯。　　5 ...

在基础化学品、精细化工产品、医药品生产中，通常都会涉及到大量悬浮液的固液分离操作。几十年来，推送式离心机和刮刀离心机已经被证明在分离工艺中可以有效地节约大量能耗。基于在此领域的多年经验，FERRUM现将其先进的离心机产品分为四大类，并且开创了降低客户总体投资成本的新概念与新思路。 推送式离心机 推送式离心机最显著的特点在于其独特的设计，能够实现固液分离工艺的连续性操作。固液混合物通 ...