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β2为了建立β2微球蛋白（β2-m）时间分辨荧光免疫分析。以羊抗兔抗体包被板条，双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺五乙酸络合Eu3+及标记β2-m，发光增强系统为以β二酮体为主的增强液。采用竞争法建立β2-m时间分辨荧光免疫分析，数据采用双对数法函数和四参数logistic函数数据处理程序处理。结果此法的批内和批间CV分别为2.25%和2.91%平均回收率为101.06%，灵敏度为0.06%mg/L，可测范围为0.06~12mg/L。本方法与白蛋白、肌红蛋白均无交叉反应。溶血对本法无临床初步应用所检测结果与放免法吻合。试验结果表明，β2-m-TRFIA法的敏感度、特异性、准确度等指标符合临床诊断要求。

【求助】如何运输细胞 参与者：fengxue19840112 我要从烟台把干细胞带回北京，路上大约需要20个小时，烟台这边的老师说可以把克隆挑下来悬浮在培养液里，放在一个EP管中带回去.然后再给它接种到新的滋养层细胞上.不知道有没有人这么做过，效果如何?可以的话请将答复发到我的邮箱里，非常感谢. 参与者：zhangzhanli2008 可以用干冰保存快运，一般１０公斤干冰３－４天应该没问题 参与者 ...

为建立抗-HCV的时间分辨免疫荧光分析法IFMA，以HCV抗原包被微孔板，样品中的抗-HCV、Eu3+标记羊抗人IgG形成夹心，以β-二酮体为增强液，数据采用Log-Logit函数和四参数Logistc函数数据处理程序处理。结果表明，方法的批内和批间CV分别为3.64%和4.39%，平均回收率105.58%，可测范围为1.01—17.34NCU/mL，灵敏度为0.03NCU/mL。本法与HB-sAg有0.23%的交叉，与 HBeAg有0.04%的交叉。278例正常对照组血清抗-HCV浓度均小于1NCU/mL。结果提示，高度灵敏、稳定的抗-HCV IFMA方法的建立为临床和科研工作提供了一种非放射性标记定量检测分析的方法。

摘要： 流式细胞仪是分选细胞结构与功能，准确迅速选标记细胞的仪器。本文讲述流式细胞仪的主要组件，工作原理及其实际应用。 流式细胞仪（flow cytometer）是采用流式细胞术的典型仪器，它能迅速的对单个细胞及其群体的化学物质的含量与种类作出分析，对含指定化学物质的细胞进行分选。 《流式细胞仪构成与工作原理》下载 点击这里下载 ...

Accuri 的C6流式细胞仪系统是一种全功能、二激光、六探测器分析流式细胞仪系统，包括：C6流式细胞仪、CFlow 软件、电脑。C6的流式细胞仪系统提供最畅销的流式细胞仪，而且价格少几倍。C6流式细胞仪系统以敏感的探测器捕获和激发前散射光和旁散射光，以及4个荧光探测器的可调光学过滤器。CFlow软件使搜集数据和分析变得简单快速。CFlow软件如此直观，让您启动并运行一个小时内得到您的Accuri ...

目的:合成固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂的中间体-4,4'-二溴-6,6'-二甲基2,2'-联吡啶。方法:根据自行设计的合成路线，以2-氨基6-甲基吡啶为原料，经重氮化、乌尔曼偶联合成6,6'-二甲基-2,2-二吡啶，再经氧化、硝化、溴化、脱氧等合成4,4-二溴-6,6'-二甲基2,2-二吡啶。结果：经元素分析、红外光谱 ,核磁共振波谱等方法证明，成功的合成了4,4-二溴-6,6'-二甲基2,2'-二吡啶。结论：通过自行设计路线完成了4,4'-二溴-6,6'-二甲基-2,2'-二吡啶的合成，为固相时间分辨荧光免疫分析的应用提供了有价值的中间体和制备方法。

目录 前言 第1章 综述 第2章 液流系统 第3章 散射光信号及荧光信号 　　3.1 散射光信号 　　3.2 荧光信号 第4章 光电系统 　　4.1 光平台 　　4.2 光学滤片 　　4.3 信号探测器 　　4.4 阀值 第5 章 数据分析 　　5.1 数据采集及显示 　　5.2 设门 　　5.3&nb ...

通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂4,7-二氯磺基苯-1,10菲罗啉-2,9-二羧酸标记抗-乙型肝炎表面抗体（HBsAb）IgG实验，对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明：BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应，反应后蛋白质的相对生物活性高于78%，标记比为 23～55，蛋白回收率达60%以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA-Eu3+-（HBsAb）IgG标记物。利用自建的分析方法，测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。

目的 　用竞争法建立抗HBc时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）方法。方法 　以基因重组HBcAg包被板，Eu3+.异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 （Eu3+-DTTA）标记抗 HBc-IgG单克隆抗体，建立抗HBcTRFIA方法。数据采用Log2Logit函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。结果 　方法的批内和批间变异系数分别为2.30%和6.30%，回收率为96.72%，灵敏度为0.2NCU/ml。本方法与抗HBs和抗HBe无交叉反应，Eu3+标记物稳定6个月以上。结论 　TRFIA是一种新的抗HBc免疫检测技术，具有灵敏度高和稳定性好等优点，能够用于定量测定抗HBc-IgG。

目的 　研制人C肽（C-peptide）时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）试剂盒。方法 　采用双抗体夹心一步法建立C肽TRFIA试剂盒，对试剂盒的各项指标进行评价。结果 　试剂盒的可测范围为0.5～22ng/ml，灵敏度为0.045ng/ml，批内、批间的变异系数（CV）分别为4.1%～6.7%和5.4%～6.8%；与胰岛素无交叉反应，与胰岛素原的交叉反应率为9.0%。30份血样用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测，其相关系数为 0.992。结论 　试剂盒各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品试剂盒。

【求助】钙离子的测定 参与者：99shaoshuai 请问各位师兄，师姐，用Fura-2/AM标记，荧光双波长测细胞内钙离子浓度时，悬浮细胞时，悬浮液里含不含Ca2+，Mg2+离子？如果含Ca2+，Mg2+离子的话，会不会影响细胞内钙离子的测定？为什么？非常感谢！ 参与者：yangchunzhang1 AM基团可以特异的标记细胞内游离钙离子，因而不用担心外液的影响。具体机制请参照染料的说明书。 没 ...

【求助】骨髓瘤细胞的体内接种问题 参与者：qj_82 请教各位：骨髓瘤细胞如果要进行乳鼠或者大鼠的体内接种，是采用腹腔注射，还是皮下注射？还是直接注射在脾脏上？细胞密度要达到多少才有比较理想的接种效果？ 参与者：zhangzhanli2008 皮下１１０的７次方－３１０的７次方/ml 腹腔１１０的６次方/ml ...

流式细胞仪主要由以下五部分构成：①流动室及液流驱动系统②激光光源及光束形成系统③光学系统④信号检测与存储、显示、分析系统⑤细胞分选系统。 一、主要技术指标 1．流式细胞仪的分析速度：一般流式细胞仪每秒检测1000～5000个细胞，大型机可达每秒上万个细胞。 2．流式细胞仪的荧光检测灵敏度：一般能测出单个细胞上<600个荧光分子，两个细胞间的荧光差＞5%即可区分。 3．前向角散射（FSC）光检 ...

根据作者E-mail地址，向作者索要。这是一种看似麻烦，实际非常有效的办法。为了更方便大家向作者索取原文，特意写了一份英文信函的模板，您只要把作者姓名、文章标题等等加上就成了。拜托您使用时稍加改动，避免千篇一律。信的内容如下： Dear Mr./Mrs.： ________（作者名） I am a graduate student of NanJing Medical University i ...

【求助】sf9，空斑试验，滴度测定 参与者：xiaoniziwendeng 我用的是bac-to-bac系统表达的目的蛋白。加上荧光底物后，96孔板读数，野生病毒和目的病毒相差不大，而且细胞感染后脱落严重，我该如何做呢？很希望能得到大家的帮助 参与者：yangea 以下问题请参考排除： 1、是挑取的单空斑进行病毒扩增的吗？ 2、荧光底物是否摸索了浓度梯度，即是否找到了作用最为明显的使用浓度； 3、 ...

免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。免疫组织化学的方法有多种，其实都大同小异，不同点只是在于显色基团！ SP法 1）脱蜡、水化； 2）PBS洗2～3次各5分钟； 3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室温静置10分钟； 4）PBS洗2～3次各5分钟； 5）抗原修复 ...

【求助】HEK293细胞中是否能查到p53蛋白 参与者：yuncheng1973 请问各位同行，正常的人胚肾HEK293细胞做免疫细胞化学染色是否能测到p53蛋白呢？因为p53蛋白在正常细胞中含量很低，所以担心会测不到，有谁做过可以告诉我吗，谢谢！ 参与者：louise3653 你的问题提得好。 HEK293的详细资料请参看美国ATCC网： http://www.atcc.org/common/c ...

【求助】关于血管生成实验 参与者：erik 想设计一实验研究一蛋白对肿瘤细胞血管生成的影响，但不知道需要几种实验方法同时运用才能说明问题，或者说哪几种是常用的（最好简单易行），我是外行，谢谢指教！ 参与者：viv2005 动脉环，小管生成，鸡胚，这几个比较常用，要么就是直接上动物 参与者：erik 我的意思是同时做哪几个就可以说明问题，呵呵，谢谢您的回复！ 参与者：viv2005 我们都是一起做的 ...

【求助】悬浮细胞的免疫组化 参与者：joveandjuno 各位前辈，我想做悬浮细胞的免疫组化，看帖子说应该滴片，滴完片子怎么做组化呢？ 用不用固定什么的？ 我想要看的抗原在细胞膜上。还有，贴壁细胞做免疫组化的话，观察细胞膜上的抗原，应该用什么固定？ 谢谢～ 参与者：laugh 用多聚赖氨酸包被片子来滴片，滴片后离心，去除多余液体，一般用甲醛或多聚甲醛固定，也可以视情况用其他固定剂如冷的丙酮或乙醇 ...

【求助】谁知道液体闪烁仪的探测下限啊 参与者：joytcm 哪位知道液体闪烁仪的探测下限啊，最小能测多少微居呀，多谢啦 参与者：fishbody 这很难说。不同的仪器对不同的核素的测量效率是不一样的，而且液闪的测量还由闪烁液转换光子能量效率的因素。 另外，液体闪烁仪测量到的是cpm（count per minute），而不是uCi。 一般，0.01uCi甚至更低的放射性量就可以测量的。 参与者：j ...