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        我培养A549细胞的经验

        互联网

        25919

        我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。

        我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。

        培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打细胞(我们这大概吹打150次左右,注意四周边缘的细胞较密,要多吹打几次,最好慢慢吹不要产生泡泡),然后分装,如果分装时细胞液不够,可再分别加入培养基。

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