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冰醋酸，有酸性气味的无色透明液体，密度：1.05；冰点：16.6℃；沸点：118.1℃。用于制造氯乙烯塑料、醋酐、有机醋酸酯、醋酸盐（铅、铝、铜等）及醋酸纤维：也可用于染料、制药、罐头食品、食品防腐、色素生产等工业。

丙酮，透明、无色、易挥发辛辣气味的液体。沸点：56℃；蒸气密度：2.0；闪点：-18℃；自燃点：538℃。爆炸极限：2.5~13%。蒸气有甜味，似薄荷香味。作为一种溶剂，用于许多工业。用来制造涂料、清漆、除漆剂、橡胶、塑料、炸药、染料、人造丝和摄影用化学物质。

QIAgenes 预制蛋白表达载体（QIAgenes Expression Kit）是QIAGEN和GENEART合作推出，专门针对35,000个人类基因所设计，目的在于解决人类蛋白表达瓶颈难题。为优化人类蛋白在E.coli 、昆虫细胞和哺乳动物细胞中表达所设计。 采用最权威的Gene Optimizer™软件，对DNA序列进行以下方面优化……

对扩增产物进行可重复性的定量长期以来一直是科学家和研究者的目标。传统的方法需要对终产物进行凝胶电泳分析。这种方法可以确定目的产物和竞争产物的大小，估算纯度，计算条带强度。然而，所用扩增试剂和体系的变动会造成扩增的终产物的重复性有较大的变动，成为这种方法的主要弊端。

对扩增产物进行可重复性的定量长期以来一直是科学家和研究者的目标。传统的方法需要对终产物进行凝胶电泳分析。这种方法可以确定目的产物和竞争产物的大小，估算纯度，计算条带强度。然而，所用扩增试剂和体系的变动会造成扩增的终产物的重复性有较大的变动，成为这种方法的主要弊端。

PFEG（Plused-Field Gel Electrophoresis）技术是将细菌完全包裹在一种特殊的琼脂中，然后加入一些化学试剂，比如十二烷基肌氨酸钠，蛋白酶K等，将细菌中的蛋白成分全部溶化，消化，只剩下整个序列的DNA。经稀有限制性内切酶消化后，切割成大小不等的片断，然后将其置于脉冲场电泳槽中电泳，完成片段分离的过程。经染色脱色后，在读胶仪上显现酶切后的电泳图谱，并经统计软件的分析，即可判断出条带的不同，同时做出细菌的同源性分析，从而达到分型的目的。其中能影响电泳图谱的参数很多，如电泳的转换时间，电泳的总时间，电泳的角度，电压，电泳液的温度等等，且不同的参数会得到不同的电泳图谱。

inverse-PCR是克隆插入片段侧翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假阳性太多，而Inverse-PCR一般只要有特异条带，基本上就是目的片段。

（1）消化细胞后以1500r/min离心，去上清后重悬于冰冷的1×TBS中，再次离心加入0.5ml提取缓冲溶液（RNA酶临时加入），移入EP管中。（2）37℃孵育1h，加4μl蛋白酶K/ml，50℃孵育3h。……

寻找差异表达的基因有不少方法，抑制消减杂交（SSH）是比较有效的一种方法。以Clontech的PCR-Select cDNA Subtraction Kit为例：将样品（tester）和对照（driver）的mRNA分别反转录并合成为双链cDNA后进行酶消化；样品（tester）分为两组，分别加上不同的adaptor1/2；再将两组样品（tester）分别与过量的对照（driver）杂交，两份杂交结果混合，加入过量的对照再进行第二轮杂交；补齐adaptor然后用PCR选择性扩增。

利用亚精胺对含多糖、多酚类物质较多的植物、真菌等材料的DNA进行纯化，以去除杂质，利于后续试验。1、加入400mlTris-HCl（100mM 8.0），溶解DNA……

1、取0.1~0.2 g左右小麦叶片于1.5 ml的Eppendorf离心管中，将离心管直接放入盛液氮的冰壶中冷冻。从冰壶中取出离心管，用小玻璃研棒直接插入离心管中迅速研磨，至淡黄色粉末为宜；2、向离心管中加入600 ml的DNA提取缓冲液“S”，振荡充分混匀，65 ℃水浴30 min，其间温和混匀几次；……

1、取适量小麦基因组DNA，用适量的限制性内切酶消化完全（约5 U/mg DNA，酶切12 h左右），取少量电泳检测酶切完全性；然后依次用酚：氯仿和氯仿：异戊醇抽提，乙醇沉淀。而后溶解在20 ml TE Buffer中；2、在1%的琼脂糖凝胶上电泳10~12 h，电压为3 V/cm；……

由于真菌菌丝体中多糖含量较高，很多方法不易去除干净，不能用于做基因组酶切。使用如下方法提取菌丝DNA产量高，多糖和蛋白质含量低，符合分子生物学研究要求。

　　PCR 技术现在已成为现代分子生物学实验工作的基础技术和有效工具，在医学、农业、检验检疫等领域中使用十分广泛。其核心设备－PCR仪经过不断改进，已经越来越完善和智能化，分类也更加细化，但厂家一般自行命名型号，技术指标的参数也不统一，给用户的选择带来了困惑和麻烦。 　　总体来说PCR仪可分为普通PCR仪、梯度PCR仪器和实时荧光定量PCR仪等。 　　下面将列出一些PCR仪器生产商/品牌供评比。

原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。

第一链cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法，各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。随机引物法是三种方法中特异性最低的。Oligo（dT）起始比随机引物特异性高。基因特异性引物（GSP）对于逆转录步骤是特异性最好的引物。

引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策为：①选定一个好的引物合成单位。②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏，导致引物变质降解失效。④引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。

人类基因组标准寡核苷酸库针对人类基因组中20，726个确证的基因设计了22，740个70mer的寡核苷酸探针。每一个探针都经过了严格设计和优化，从而确保了基因表达阵列分析能得到非常好的结果。

随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入，PCR已成为一门相当成熟的常规技术，而热聚合酶（即Taq酶）的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上有多种Taq酶，能够满足多方面的实验需要。那么，如何选择最合适的Taq酶？根据用户经常考虑的指标，如特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度、能否进行复杂模板扩增以及优化条件难易等等，我们在这儿将主要的Taq酶归归类，其性质、用途也就一目了然了。

已稀释好的ABC和TMB显色液在加入酶标板孔前都应预先在37℃中平衡至少30分钟。试剂或样品稀释时，切不可忘记混匀。每次检测都应该做标准曲线。用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数。