全部

PriCells: 原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法原理： 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度，如果染料与含有脂类的试样接触，便有大量染料进入脂类物质的结构内，使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化锇染色，脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。配制试剂：1.苏丹红Ⅲ染色液：将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70 ...

PriCells: 原代细胞富尔根（Feulgen）反应显示DNA基本原理：显示DNA的传统方法是富尔根（Feulgen）反应，切片先用稀盐酸处理，DNA经弱酸（1mol/L HCL）水解后，在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应，使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响，故染色具 ...

PriCells: 原代细胞骨架的染色方法微丝的显示方法步骤：1. 用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次，每次30s；2. 用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min；3. 用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次，每次10min；4. PBS漂洗3次；5. 用罗丹明（rhodamine）标记的鬼笔环肽（phalloidin）（1：10）室温中反应15min；6. ...

原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观察原代细胞均可。吖啶橙对活原代细胞毒性小， ...

PriCells: FITC标记抗体-Chadwick氏法 试剂：抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞；材料：离心机及离心管、三角烧瓶（25ml）、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）等；方法与步骤：1. 抗体的准备。用0—4℃ pH8.0的PBS将免疫球蛋白溶液浓度稀释 ...

FITC标记抗体-Marsshall氏法材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25—50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等；方法与步骤：1. 抗体的准备。量取适量已知浓度的球蛋白溶液 ...

PriCells: 原代细胞甲基绿-哌咯宁法显示DNA和RNA基本原理：甲基绿（methyl green）和哌咯宁（pyronin）均为碱性染料，因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷，易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷，易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理与核酸分子的空间构型有关。配制试剂：1 ...

四乙基罗丹明标记抗体：1.称取1g RB200及2g PCL5放在乳钵中于通风橱中研磨5min；2.加入10ml无水丙酮，3.不4.断搅拌，5.5min后过滤，6.用滤液进行标7.记抗体。剩 余部分吸附在滤纸上，于4℃干燥保存；8.量取一定量的浓度为20mg/ml的抗体，9.按1：1：1的比 ...

PriCells: FITC标记抗体-改良法 试剂：1.0.01mol/L pH7.2 PBS配方。将NaCl 18g、Na2HPO4 1.15g、KH2PO4 0.2g，2. 溶于2000ml三蒸水中，调整pH至7.2；3.0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液配法。量取0.5mol/L Na2CO3（5.3%）10ml 加入0.5mol/L NaHCO3（4.2%） ...

PriCells: Isolation culture and purification of Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells (HPMECs)1.HPMECs were isolated from lungs resected from tissue of normal human or adult patients with m ...

PriCells: Isolation culture and purification of Human Pulmonary Arterial Smooth Muscle Cells (HPASMCs)1.HPASMCs were isolated from lungs resected from tissue of normal human or adult patients with ma ...

PriCells: 正常人甲状腺细胞的原代培养方法实验材料：1. 甲状腺细胞材料来源：人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. 培养用液：DMEM培养液，含15%—20%小牛血清、0.6mmol/L的 ...

PriCells: 藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法 藻红蛋白标记抗体的方法：1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备；（1） 将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中；（2） 将以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合，而后装入透析袋置入50mmol/L pH6.8的P ...

PriCells: 正常小鼠腹股沟脂肪垫获取脂肪源干细胞实验材料：1.Hank’s缓冲盐溶液（HBSS）；2.ASC培养基：含10%胎牛血清的DMEM，添加1%的P/S；3.胶原酶溶液：100ml Hank’s缓冲盐溶液中加入1g牛血清白蛋白和0.1gⅡ型胶原酶；4.聚乙烯吡咯酮碘溶液；5.陪替氏培养皿，9cm；离心管，50ml；组织培养瓶，25cm2；6.剪刀（2把），镊子（2把）； ...

PriCells: 正常人羊膜细胞（HAM）原代细胞培养实验材料：1.人胎盘；2.PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（庆大霉素，50μg/ml；两性霉素B，1.25μg/ml；链霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；3.丙三醇；4.含50%丙三醇的DMEM；5.胰蛋白酶/EDTA；6.Millicell微孔膜组织培养插片；7.塑料刮片和无菌棉拭子；实验方 ...

PriCells: 正常人角膜上皮细胞和干细胞的分离实验材料：1.完整的人角膜；2.GMF-Saline G；3.中性蛋白酶Ⅱ，1.2U/ml（用DMEM/F12/GASP稀释2.4U中性蛋白酶Ⅱ）；4.胰蛋白酶/EDTA；5.DMEM/F12/GASP；6.DEME/F12/2FB/GASP：DMEM/F12/GASP含2%FBS；7.CMF/GASP；8.LSC培养基；9.弯 ...

PriCells: Isolation of human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (hADSCs)Adipose tissues were washed at least three times with sterile phosphate-buffered saline and treated with PriCells Iso ...

PriCells: Introduction of Isolation and Culture of Human Alveolar Epithelial Cells 1.1. BackgroundThe human lung consists of more than 40 different cell types. The morphology and function of constitue ...

PriCells: 中国人组织源性原代细胞是最适于在中国进行体外检测和药物研发进行细胞培养的科研单位和生物公司原代细胞培养最大优点是：细胞直接来源于机体组织，生物性状尚未发生大的变化，在一定程度上能够反映体内的状态。细胞株和原代细胞不是完全一样。并非每一种组织源性细胞都有相应的细胞株，有些细胞必须养原代，细胞株是来源于原代细胞，原代细胞导入了病毒增殖基因并转变为细胞株，细胞株带有癌变细胞的特点。细 ...

PriCells: 利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞试剂和材料：1.2—4代的间质细胞；2.HBSS/2FB；3.Hoechst 33342染料，1mg/ml水溶；4.碘化丙啶（PI），2mg/ml水溶；5.维拉帕米，500μg/ml水溶；6.DEME/2FB；7.胰蛋白酶/TrypLE：TrypLE Express或0.25%胰蛋白酶，溶于CMF- ...