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PriCells: 正常人骨间充质干细胞的培养实验材料：1. 骨髓来源：骨髓材料由健康人提供；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 分离液：密度为1.073g/ml的Percoll溶液；4. DMEM-LG培养液：含1000mg/L葡萄糖的DMEM培养液，补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素10 ...

正常大鼠前脂肪细胞的培养实验材料：1. 细胞来源：4周龄雄性Wistar或其它品系大鼠；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.4；3. 消化液：2mg/ml胶原酶溶液。用DMEM培养液配制，并加入牛血清白蛋白20mg/ml；4. 培养液a：DMEM培养液，10%胎牛血清、100IU/ml青霉素、50μg/ml链霉素； ...

PriCells: 正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养实验材料：1. 实验动物：5月龄兔；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 完全培养基：DMEM培养液，补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml4. 化学限定性培养液：基础培养基为DMEM培养基，添加胰岛素6.25&mu ...

正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养实验材料：1.实验动物：5月龄兔；2.清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3.完全培养液：DMEM培养液，补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml；4.化学限定性培养液：基础培养基为DMEM培养基，添加胰岛素6.25μg/ml、转铁蛋白 ...

PriCells:正常小梁细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 器械：小梁剪与无齿镊等；4. 消毒液：200IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 培养液：基础液由DMEM培养基加入HEPES 6.0g/L、NaHCO32.2 g ...

PriCells: 正常角膜内皮细胞培养实验材料：1. 角膜材料：可以取自人眼、兔眼或者牛眼，人眼材料最好来自胎儿；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 特殊器械：虹膜恢复器；4. 消毒液：1：5000的升汞溶液与100IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 消化液：0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA混合溶液；6. ...

PriCells:正常视网膜色素上皮细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 特殊取材器械：眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托；4. 消毒液：200IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 消化液：0.01%EDT ...

PriCells: 正常人骨膜内成骨细胞原代培养实验材料：1. 骨组织来源：手术切除之骨组织；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液；4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3调节至pH 7.2 ...

PriCells: 正常视网膜米勒细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶-100IU/ml透明质酸酶混合消化液；4. 消毒无菌的手术器械若干；实验方法：1. 取材（1）取自人的供体眼球； 1） 经常规消毒程序消毒后，于锯齿缘 ...

PriCells: 正常晶状体上皮细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 器械：无齿显微小镊子2把、培养板和培养皿若干；4. 培养液：为含15%胎牛血清的DMEM培养液；实验方法：1. 取材1）摘取动物或人的供体眼球，作常规消毒处理；2）用刀片沿角巩膜缘环 ...

正常滑膜细胞原代培养实验材料：1. 实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清；实验方法：1. 将大鼠处死后，用75%酒精消毒；2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉，暴露长骨两端的关节，取出关节面滑膜组织 ...

PriCells: 正常骨内成骨细胞原代培养实验材料：1. 骨组织来源：新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型胶原酶溶液；4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO ...

PriCells: 正常人关节软骨细胞的长期培养实验材料：1. 软骨细胞来源：20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液Ⅰ：2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液，用PBS液配制；4. 消化液Ⅱ：0.5mg/ml胶原酶，用培养液Ⅰ配制 ...

正常成熟破骨细胞原代培养实验材料：1. 细胞来源：新生大鼠或兔，妊娠6个月以内的引产胎儿等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 细胞支持物：薄骨片、盖玻片；4. 培养液：199培养基、MEM或DMEM培养基均可，须补加15%—20%小牛血清、25mmol/L HEPES及青霉素100IU/ml ...

PriCells: 正常关节软骨细胞的短期培养实验材料：1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，用PBS液配制，过滤除菌；4. 培养液：RPMI164 ...

PriCells: 原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备：1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油；2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合，研磨至无颗粒；3. 将剩余的甘油倒入研钵，于56℃保温2h；4. 加入33ml纯甲醇混匀，即为吉姆萨母液，将其保存于棕色试剂瓶内；5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen缓冲液和1份吉姆萨母液混合即得染色液；贴壁细胞染色步骤：1. 去除培养器皿 ...

PriCells: 原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法：1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液；2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端，用另一块干净的载玻片，按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上；3. 载玻片在空气中干燥后，再用甲醇固定；4. 对涂有细胞的载玻片进行染色；5. 注意，为避免细胞皱缩应尽快使涂有细胞的载玻片干燥，可摇动载玻片或用吹风机的冷风 ...

PriCells: 细胞内糖类染色方法—过碘酸席夫反应法基本原理：过碘酸是一种强氧化剂，过碘酸的氧化作用先使糖分子的乙二醇基变为乙二醛基，乙二醛基继而与Schiff试剂结合，Schiff试剂本为无色亚硫酸品红复合物，但它与乙二醛基结合后形成紫红色反应物。颜色反应的深浅取决于组织内多糖（包括糖原、黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖脂等）的乙二醇分子的多寡。基本原理：1. 席夫试剂的制备（1） 称取0.5 ...

PriCells: 台盼蓝染色法材料：1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管；2. 试剂：0.4%台盼蓝染液；3. 台盼蓝（Trypan blue）：0.4g；4. 生理盐水：100ml；操作步骤：1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细 ...

PriCells: 苏木精-伊红（HE）染色染液制备：1. 苏木精染液（1） 称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中；（2） 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液；（3） 母液可长期保存。用蒸馏水以1：20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存，但每次染色前宜过滤，去除氧化膜；2. 伊红染液伊红有醇溶 ...