由那位老师作过醛固酮合酶的RT-PCR,我已经P了两个月了,还是为扩出来。我用Wistar 大鼠的心肌及肾上腺组织提取RNA并RT,后进行PCR,已经换了3个引物,其中由两对引物是文献(英文一篇)报道的,但还未P出来,PCR条件我都试了好多次了,同样的标本P其他的3对基因都很顺利,就这对出不来,郁闷死了!!如果出不来结果以前的试验就白做了。下面是我的一对引物及基因序列:请帮忙分析一下,尤其是作过醛固酮合酶CYP11b PC ...
Chelex-100法提取微量DNA1. Add 1/50 volume of Proteinase K (10 mg/mL) and incubate the sample at 65°C for 2 hrs to overnight.2. 200 uL 5% Chexlex-100,add 10 uL proteinase K (20 mg/mL),inculate 2 hrs in 37 °C.3. 50ul Chelex液及lfl蛋白酶K水,56%温水浴消化2h后,煮沸8min,迅速放人冰盒冷却4min,以5000r/min速度离心lmin。吸取上清液 ...
宏基因组学Metagenomics Methods and Protocols基因X (美)(英文版)Metagenomics has proven to be a powerful tool for exploring the ecology, metabolic profiling, and comparison of complex microbial communities as well as its important applications in the mining of metagenomes for genes encodi ...
TOP10 chemically competent cells( modified from http://openwetware.org/wiki/TOP10_chemically_competent_cells#CCMB80_buffer)I also use this protocol to make Ecoli compent cell. It is pretty good.You can start from the fresh clone on plate, but you need a big clone or several clone ...
这一方法简单, 省钱, 不用酚/氯仿, 可用于酶切鉴定和转染细胞测试表达情况(尤其是直接观察表达情况的荧光表达载体). 具体操作步骤如下:Miniprep Plasmid Extraction1. Grow bacteria O/N at 37°C with vigorous aeration in 3 ml LB or 2xYT with appropriate antibiotic.2. Harvest by micro-centrifugation at maximum rpm (16000g) for 1 min (keep the 1 ml left ...
:)Genes and DiseaseBethesda (MD)本书汇编了关于基因与疾病关系方面内容的文章。基因疾病是由他们造成的人体的异常组成。同时,这种疾病影响身体的各个系统,可出现在不只一个章节Genes and Disease is a collection of articles that discuss genes and the diseases that they cause. These genetic disorders are organized by the parts of the body that ...
Ambion and Applied Biosystems have joined forces to provide a complete convenient, solution for performing gene silencing experiments and validating the results by real-time RT-PCR. Ambion's Silencer™ Validated and Silencer Pre-designed siRNAs eliminate the guesswork--and t ...
http://www.med.unibs.it/~marchesi/subjects.html其中的内容包括:Chemistry Review MaterialIonic Equilibria ReviewThermodynamics ReviewBasic Chemistry of BiomoleculesProtein StructureHemoglobinEnzyme Kinetics-Part IEnzyme Kinetics-Part IIVitam ...
下面的内容是我在浏览一些网站的时候发现的,感觉说的很通俗易懂,把多态性Polymorphism这个概念的方方面面呈现在了我们眼前,如果你对Polymorphism比较感兴趣,或者对这个概念还有疑惑,建议看一下,尽管是英文,但写得很值得一看。以下内容为网上搜集整理。Polymorphisms Genetic polymorphisms are different forms of a DNA sequence. "Poly" means many, and "mor ...
就是在一篇文章中他们从一个序列数据库中筛选可能的miRNA,第一步是筛选可能的带hairpin的miRNA的precusor。他使用的是一个perl编辑的程序,可是肯定不会共享,看到其他的文章也是用了自己的程序,请问有没有免费的现成的程序可以用????文章在下面!!!The Arabidopsis genome version 3 and the O. sativa genomereleased by The Institute for Genome Research ( ...
siRNA Design1. Select siRNA 19-mersFirst, look around in the literature if any siRNA for your gene has been already made or have a look at siRNA Database (small though)There is a growing numbers of tools for selection of siRNA 19-mers based on a provided cDNA sequence. We use siRNA Selection Program devo ...
这个是应用feeding的方法在线虫中应用RNAi,据研究称这是应用于线虫高通量RNAi最佳的方法。不过这个library的价格不知道怎样,不知道国内有没有买到这个library的实验室,如果有不知道分享价格如何?我拟使用该方法进行线虫基因组范围内的RNAi,哪位有这方面的经验能否赐教一二 谢谢。http://www.hgmp.mrc.ac.uk/geneservice/reagents/products/descri ...
端粒长度的测量方法,是通过实时荧光定量PCR进行的,希望对做端粒的同行有所帮助!文件613k,无法上传,贴前言来共享吧。INTRODUCTIONThe traditional method of measuring telomere length insamples of total human genomic DNA determines a meanterminal restriction fragment (TRF) length (1). The methodrequires large a ...
2006年10月23日Times Asia Edition对 今又生 研究及上市的的报道原文连接:http://www.time.com/time/asia/covers/501061030/profiles.html相关连接(这个也很有意思):http://www.time.com/time/asia/~undefined*~LyesGroundbreakersFrom_biotech_to_nanotech~E_three_Chinese_pioneers_look_to_lead_the_nat_...
贴出我的问题来晒晒,也很郁闷的一件事。相同方法提Case & Control两组DNA,同时扩增片断A(易扩增),问题Case组结果良好,而Control组没有结果;于是分别混出一支mix。Nanodrop测浓度:见二者结果相仿,就又把A扩了一遍。下图中2-7道为模扳上样梯度。鉴于Nanodrop的比值没有太大偏差,考虑control溶液中的其他未知杂质,采取酚-氯仿-异戊醇重新抽提、乙醇沉淀洗盐纯化,原体积1/2的ddH2 ...
美国匹兹堡大学的DNA序列分析课程,包括引物设计、酶切等过程的生物信息学分析。Data Analysis ToolsQuEST - ChIP-seq data analysis packageHOMER - Hypergeometric Optimization of Motif Enrichment -- ChIP-seq and Motif DiscoveryBowtie - An ultrafast memory-efficient short read alignerTophat - A spliced re ...
假基因的研究进展来自:http://www.sciei.com/bbs/dispbbs.asp?boardID=27&ID=552&page=1随着人类基因组计划不断深入,对于占人类基因组97%的非表达序列的研究也逐渐成为热点。在基因克隆和基因表达研究的过程中,返座假基因是我们经常碰到的问题。本文不仅对返座假基因的结构特征进行了小结,并且对返座假基因编码潜能、返座机理以及在进化过程中的作用进行了综述,并报道了该领域的研 ...
核酸疫苗(nucleic acid vaccine),也叫基因疫苗(genetic vaccine)、核酸免疫(nucleic acid immunization)、DNA免疫(DNA based immunization),它是利用基因重组技术直接将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA)与质粒重组后,直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗包括DNA疫苗( ...
《科学》:我国完成桑蚕大规模基因组重测序并绘制完成世界第一张基因组水平上的蚕类单碱基遗传变异图谱北京时间8月28日凌晨2时,由深圳华大基因研究院与西南大学合作的研究成果“40个基因组的重测序揭示了蚕的驯化事件及驯化相关基因”在国际权威学术刊物《科学》上发表,这是科学家继2003年在家蚕基因组研究领域取得进展后的又一重要成果。该研究由中国工程院院士、著名蚕学家向仲怀教授带领完成;西南大学教授、中国家蚕基因组主要 ...
碱法质粒抽提用到三种溶液:溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。具体分析及原理:1,25 mM Tris-Cl。控制溶液的pH。2,50 mM葡萄糖。悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。3,10 mM EDTA,pH 8.0。EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂,抑制DNase的活性,和抑制微生物生长。在溶液I中加入高达 10 mM 的EDTA,是要把大肠杆菌细胞中的所有 ...