全部

redhq 各位高人，如何对microRNA和NF－kB的关系展开相关研究呢？freecell Refer to this paper:http://ukpmc.ac.uk/articlerender.cgi?artid=960261yfmxd 谢谢版主,正在读这篇文献,希望以后能跟您多请教,谢谢!本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

huangwenshu 请问“胱氨酸/谷氨酸反向转运体”的作用是什么，他的前体谷氨酸和半胱氨酸那个对他的作用影响较大？Fasta921 在生理状态下Glu/胱氨酸转运体（XC-）释放一分子的Glu，摄取一分子的胱氨酸入细胞内，两者藕联转运。胱氨酸在细胞内迅速被还原为半胱氨酸，一部分参与细胞内重要自由基清除剂谷胱甘肽的合成，另一部分则出细胞氧化成胱氨酸，重新参与XC-系统循环。在正常情况下，Glu与胱氨酸通过Glu/胱氨酸转 ...

pumcliu 关于基因芯片结果分析方面，请高手帮忙，多谢！小长 QT (Quality Threshold) Clustering Clustering是聚类的意思。基因芯片研究中，也许可以译为“共表达分析”。基因的共表达分析（QT Clustering）下图是使用QT clustering方法对一个时间系列实验进行聚类，每一类的基因具有相似的表达谱，QT clustering方法并不一定要把所有的基因都进行分类，它根据您规定的最小相关性和最小 ...

hawkyin 1.当你已经发现了一个新的基因序列，但对其功能不知道，如何从分子水平研究它？2.有一个基因的蛋白产物定位于细胞核中，请设计一个研究方案进行后续的研究工作？Fasta921 hawkyin wrote:1.当你已经发现了一个新的基因序列，但对其功能不知道，如何从分子水平研究它？2.有一个基因的蛋白产物定位于细胞核中，请设计一个研究方案进行后续的研究工作？1、（1）定位分析（2）启动子分析（3）干涉该基因或过表达分析（4 ...

cancerlab 怀疑我所研究的mRNA一段约300bp的序列上结合了一个RNA binding protein，但是无从下手，不知道有什么方法可以将这个蛋白鉴定出来？望高手指教。Fasta921 可采用RNA与蛋白质相互作用实验，比如：EMSA （electrophoretic mobility shift assay）cancerlab 谢谢！ 不过我目前困惑的问题是，那上面结合的可能是哪个蛋白。不知道有没有合适的高通量的筛选方法或者信息学 ...

xshdao 因课题需要开展microRNA表达载体构建，查了一些文献好像很少有带GFP报告基因的microRNA表达载体，如pCDNA3.1。请问是否有带GFP的表达载体可以用了表达microRNA？请各位高手发表高见！freecell google: microrna expression vector with gfpwanghm200810 有这样的载体，还有带抗性基因的载体。geneyouth 用pEGFP -C3载体 就可以， pri-miR ...

th_chen 基因转录调控中，存在大量的活化子和抑制子。通常人们会把他们区别对待，活化子如Gal4，行使转录激活功能；抑制子如HDAC，行使转录抑制功能。但是，目前越来越多的实验表明，很多活化子能同时作为抑制子存在。如Oct4是干细胞中一种相当重要的调控因子。它与启动子的结合激活了多潜能基因的表达，却抑制了发育基因的表达。现在的问题是：在同样的细胞环境中，作为抑制子，它募集的是沉默复合物，而作为活化子，它最终募集的是 ...

roy2708 信号转导和抑制剂如PD098059等很精通，由于本人第一次做有关信号转导方面,我的问题为:我的课题大体思路: 应用Morris 水迷宫训练正常大鼠，在丘脑前核检测ERK的表达情况，同时我想应用ERK抑制剂PD098059干预.1. 脑内核团给药更特异，但由于丘脑前核太小，给药太困难，所以只能选择侧脑室，这种给药方法可行否?2.PD098059侧脑室给药,量参考文献,还是需自己摸剂量?3.给药时间：PD098059在 ...

attenuator 有一个问题一直没有查出相关资料或信息。就是：β globin 蛋白在血液组织之外的细胞有没有表达，能不能RT检测出transcripts或western检测出protein。为了这个去重复实验，条件不允许，但前人肯定有做过的，教科书里没有介绍，只介绍了时间特异性（胚胎到成体），没有介绍组织特异性——除了造血组织（或成红祖细胞）之外，在其他组织里，β globin是不是就沉默了，它那一簇基因是不是从它LCR开始 ...

feiyu1024 在看一篇文献 看到-344 T allele and -344 CT/TT genotype 请问 这几个是什么区别 请高人指点Fasta921 gene polymorphism个人觉得：某对等位基因344位所对应的碱基为CT或TT。344 CT/TT genotype 作为载体包含T allele 。feiyu1024 在文章中 好像二者是有区别的 就是没看明白本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师 ...

brushnan 请问用什么来刺激细胞产生可检测到的ROS，在哪种细胞里做？谢谢！baby1_9253344 氧化性物质，如重金属中的三氧化二砷和六价铬。可以查阅一些文献spatial 加盐、加冰水等生物或者非生物刺激，均可以诱导细胞ROS的快速产生。ecust小熊 spatial wrote:加盐、加冰水等生物或者非生物刺激，均可以诱导细胞ROS的快速产生。你这个作用强度不好控制。baby1_9253344 ecust小熊 wrote:你 ...

li_ping529 请问站内有哪位战友做AKt亚型的，想交流下经验，有做过AKt亚型的转染或相关文献吗？希望能共享，谢谢~~~:Ili_ping529 没人做过吗？帮忙问下吧~~~huxueliang 没有作过具体的,最常见的是AKT-1吧不知道你说的亚型的转染是什么意思li_ping529 我是想研究AKt亚型对治疗的影响，分别转染AKt1，AKt2，AKt3进细胞，有相关文献吗？我老板以前做过，但是现在他的质粒没办法用了~wosh ...

nemoliu 研究NF-kB激活问题方面，我见有些有些人做IKB的western blot,我想请教一下NF-kB激活后IKBα与IKBβ分别是上调还是下调？通常进行的western blot检测的是IKBα还是IKBβ？觉得对这些搞不清楚，希望高手赐教，谢谢了nemoliu 自己先顶一下，00501101 哈哈哈，我一直是菜鸟，在这里问高手，现在终于可以帮助别人了。心情很好这个需要你好好的看外文文献了。IKBα主要结合P65和 ...

dingxiangyua 有哪位高手知道F-GFP和GFP-actin的抗性分别是什么?急求Fasta921 定位在膜上的GFP （F-GFP）绿荧光蛋白(GFP)标记肌动蛋白(GFP-Actin)抗性？不明白！biyuntian478 lz是啥意思？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

trick 准备做关于PKC 活化从胞浆转位到膜上的WESTERN由于是加细胞因子刺激，所以要收比较多的样品，如果要超离的话太麻烦了不知道各位有没有不需要超离的提取液体的配方由于先是做些预实验，暂时还不准备买试剂盒，但是如果大家有什么好的试剂盒也给推荐下吧:)licanming 我也需要做这个！但好像基本都是用超离和试剂盒做的！andyyu LB + 2% sds本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方 ...

jellyfish102 Tenascin和Aggrecan与VEGF之间是什么关系，Tenascin和Aggrecan是VEGF的下游基因吗，课题需要，请专家答疑，谢谢。chuckdouble 不是专家的个人意见首先, 是否**因子是**因子的上游或下游 这种问题, 需要具体到哪种模型, 哪种细胞, 哪种亚型. 不然一般不存在答案.tenascin 是个家族, 有 TNC, TNR, TNX 等等. 已有的报道是TNX会和VEGF结合, 诱导其VEGF的活性(293T cells). ...

mengxiaoyong 小弟要在绵羊上做RNAi，不知人源，鼠源U6或H1启动子在绵羊体内是否有功能？哪位大侠知道呀？先谢了！实验室里有U6或H1启动子载体！Fasta921 mengxiaoyong wrote:小弟要在绵羊上做RNAi，不知人源，鼠源U6或H1启动子在绵羊体内是否有功能？哪位大侠知道呀？先谢了！实验室里有U6或H1启动子载体！shRNA表达质粒多采用RNA聚合酶III启动子，如人源H1或鼠源U6启动子 ...

zlacrobat 这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位基因的序列有差异，那么DNA的互补配对是怎么实现的呢？DNA的2条链并不是完全相同么？Fasta921 zlacrobat wrote:这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位 ...

pl198242 请问shRNA表达载体在真核细胞中表达，一定要有真核表达的复制起始点么？ 如果只有PUC ori ，但是还有U6 启动子，是否就可以在真核细胞中表达shRNA了呢？ 这和f1 ori有什么关系么？ 由于对这方面了解很少，所以希望广大战友能予以帮助解答，谢谢！Fasta921 复制起点与启动子层面不同：PUC复制起点貌似原核复制起点啊，比如你转染前要获得大量的质粒，那么pUC origin 能保证该载体在大肠杆菌中的复制。U6启动子是确 ...

happy_840524 请问一下高手，我的MCF-7细胞老是养养就长出触角，而且长出触角后越长越慢，复苏了再养还是这样，我觉得我的培养液和操作都没有问题，因为另外一个细胞养的挺好，请高手指点。r1990en 我也是这种情况啊，不知道楼主的问题最后是怎么解决的？冬天的落阳 我的细胞也这样本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcomi ...