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        【求助】不同酸磷酸化Akt

        丁香园论坛

        6769
        检测苏氨酸磷酸化Akt与丝氨酸磷酸化Akt有区别吗?
        有区别的!要看你观察的实验指标与磷酸化哪个残基相关!如果未明确,只是想观察作用因素是否激活AKT,那可检测丝氨酸磷酸化Akt,因为AKT激活的磷酸化顺序一般是先苏氨酸磷酸化后丝氨酸磷酸化,即丝氨酸磷酸化后AKT一般都激活了。
        非常感谢!
        > 我还想麻烦问一下:
        > 如果他人已经做过某作用因素对丝氨酸磷酸化AKT影响,有统计意义,那样的话我不管做丝/苏氨酸都是重复吧!那做总的AKT 怎麽样,有意义吗?
        那不一定!因为某作用因素可能只对苏氨酸磷酸化,而对丝氨酸无影响。做总的AKT要看你的作用因素是否对AKT的量有影响,因为有时作用因素只影响AKT磷酸化的量,而对总量是没有影响的。
        yiyi1983966 wrote:
        非常感谢!
        > 我还想麻烦问一下:
        > 如果他人已经做过某作用因素对丝氨酸磷酸化AKT影响,有统计意义,那样的话我不管做丝/苏氨酸都是重复吧!那做总的AKT 怎麽样,有意义吗?


        真的是完全一模一样的实验? 如果是, 那么这个只能算是肯定别人的结果, 不能算新数据.
        因为在论文中会发现, in our study *** is observed, this result is consistent with the data of ***
        licanming wrote:
        那不一定!因为某作用因素可能只对苏氨酸磷酸化,而对丝氨酸无影响。做总的AKT要看你的作用因素是否对AKT的量有影响,因为有时作用因素只影响AKT磷酸化的量,而对总量是没有影响的。


        是的
        AKT是有两个磷酸化位点的, 就看那个某因素作用于哪个位置, 毕竟2个磷酸位点的上游不同. 以及不同的位点磷酸化后所调控的下游事件也不完全相同.

        不管是总量变化, 还是磷酸化变化, 都能够进行讨论
        :I
        非常感谢
        收益匪浅!
        chuckdouble wrote:
        是的
        AKT是有两个磷酸化位点的, 就看那个某因素作用于哪个位置, 毕竟2个磷酸位点的上游不同. 以及不同的位点磷酸化后所调控的下游事件也不完全相同.

        不管是总量变化, 还是磷酸化变化, 都能够进行讨论

        赞同!
        楼主还是要多看文献参考参考才行。
        我觉着那要看你的研究目的了吧
        只有完全磷酸化了的Akt,即Ser473 Thr308位点都磷酸化之后,Akt激酶的活性才能充分发挥的。
        licanming wrote:
        有区别的!要看你观察的实验指标与磷酸化哪个残基相关!如果未明确,只是想观察作用因素是否激活AKT,那可检测丝氨酸磷酸化Akt,因为AKT激活的磷酸化顺序一般是先苏氨酸磷酸化后丝氨酸磷酸化,即丝氨酸磷酸化后AKT一般都激活了。


        应该是先丝氨酸(Ser473)磷酸化后苏氨酸(Thr308)磷酸化。
        doctormy wrote:
        应该是先丝氨酸(Ser473)磷酸化后苏氨酸(Thr308)磷酸化。

        谢谢斑竹!我记反了!不好意思!
        两个位点的激酶可能不同
        308位苏氨酸的磷酸化为Akt活化所必需,而Ser473位点磷酸化使Akt的活性达到最大!
        是否有先后顺序?

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